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방법 논문

RNA 또는 특정 뇌 영역에서 단백질 추출에 대한 쥐 두뇌의 마이크로 해부

56.4K 조회수

DOI:

10.3791/269

2007년 8월 30일

이 논문에서

요약

여러 지역에 쥐 두뇌의 미세 절개 다른 neurodegenerative 질병의 연구를 위해 매우 중요합니다. 이 동영상은 네 개의 주요 뇌 영역의 미세 절개는 후각 망울, 전두엽의 피질, striatum 신선한 쥐의 뇌 조직에서 해마를 포함 보여줍니다. RNA와 단백질 조직의 저하를 피하기 위해 해당 지역의 빠른 제거를위한 유용한 팁은 주어집니다.

초록

여러 지역에 쥐 두뇌의 미세 절개 다른 neurodegenerative 질병의 연구를 위해 매우 중요합니다. 이 동영상은 네 개의 주요 뇌 영역의 미세 절개는 후각 망울, 전두엽의 피질, striatum 신선한 쥐의 뇌 조직에서 해마를 포함 보여줍니다. RNA와 단백질 조직의 저하를 피하기 위해 해당 지역의 빠른 제거를위한 유용한 팁은 주어집니다.

프로토콜

1 단계

설립 프로토콜에 따라 쥐를 희생. 두개골의 두뇌를 제거하고 얼음에 씻어 차가운 DEPC는 표면 혈액을 제거하는 밀리 Q 물을 취급.

2 단계

차가운 금속 접시에 놓습니다. 좌우 반구로 두뇌 BI 절반을 잘라.

figure-protocol-1

그림 1. 쥐 반구의 중간보기에서 절단 위치

3 단계

오른쪽 첫 번째 컷 후 후각 망울를 수집합니다. 플래시 -80에서 액체 질소와 저장소의 표본을 동결 ° C.

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토론

다른 뇌 영역은 다른 neurodegenerative 질병에 함께 연결합니다. 해마는 알츠하이머와 관련된 반면 예를 들어, 전두엽 피질과 striatum는 파킨슨병의 질환과 관련. 뇌 정밀 미세 절개은 우리가보다 정확하게 질병 지역의 mRNA와 단백질 변화를 검색할 수 있습니다.

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공개 사항

동물 홍콩의 대학 교육 및 연구에 살아있는 동물의 사용 (CULATR)에위원회에 의해 승인과 동물 사용을위한 건강 지침 국립 연구소에 따르면 연구에 동물의 사용을 위해 프로토콜에 따라 처리되었습니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
현미경Olympus Corporation
해부 도구금속판, 핀셋, 메스 등. RNase를 제거하기 위해 각각 알루미늄 호일로 감싸 180oC에서 8시간 동안 가열함. 사용 전 얼음 위에서 차갑게 식혀 준비함.

참고문헌

  1. Palkovits, M. Maps and guide to micro-dissection of the rat brain. , Elsevier. New York. (c.1988).
  2. Swanson, L. W. Brain maps: structure of the rat brain. 3rd revised edition. , Elsevier Academic Press. (2004).
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재인쇄 및 허가

태그

RNA 추출후각구전두피질선조체해마액체 질소