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방법 논문

설치류에서 외상후 Epileptogenesis의 아래 부분을 잘라냄 모델 준비

9.1K 조회수

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DOI:

10.3791/2840

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2011년 9월 15일

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이 논문에서

요약

부분적으로 격리 피질 ( "가격을 내리다") 외상후 epileptogenesis의 효율적인 동물 모델입니다. 여기 소설 수술 장치를 만들고이 모델을 생성하기 위해보다 정확하고 일관성있는 병변을 만들기 위해 그것을 사용하는 방법을 보여줍니다.

초록

부분적으로 격리 피질 ( "가격을 내리다") 외상후 epileptogenesis의 동물 모델입니다. 수술은 sensorimotor 피질과 대뇌 피질의 특정 영역이 크게 인근 피질과 subcortical 지역 1-3에서 격리되도록 흰색 물질 (아래 부분을 잘라냄) 아래에. 통해 절단 포함 수술 다음과 같은 두 개 이상의 주 지연 시간 후, epileptiform의 방전은 설치류 1 뇌 슬라이스에 기록 수 있으며, 전기 또는 행동 압류는 그러한 고양이와 원숭이 4-6와 같은 다른 종 생체내에서 볼 수 있습니다. 이 잘 구축 동물 모델을 생성하는 효율적이며, 외상성 뇌 손상의 여러 가지 중요한 특성을 모방한 것이었 지요. 그러나, 그것은 기술적으로 무료로 손이 작은 쥐 두뇌의 대뇌 피질의 병변 정확한를 만들기 위해 시도 도전이다. 처음에 스탠포드 대학 1 박사 데이비드 왕자의 실험실에서 설립 절차에 따라, 우리가 마우스 및 쥐이 모델의 준비를위한 수술을 수행하는 향상된 기술을 제시한다. 우리는 간단한 수술 장치를 만들고 더 정확하고 일관된 결과를 생성하기 위해 깊이와 각도 절단의 더 나은 통제를 얻을 그것을 사용하는 방법을 보여줍니다. 장치 수 있도록 간단하고, 절차가 빨리 배웁니다. 이 동물 모델의 생성은 외상후 epileptogenesis의 메커니즘에 대한 연구에 대한 효율적인 시스템을 제공합니다.

프로토콜

1. 아래 부분을 잘라냄 수술을위한 간단한 장치를 만들기

  1. 우리가 만든 아래 부분을 잘라냄 장치는 세 부분으로 (그림 1)으로 구성되어 있습니다 : 유도 관의 부착 및 바늘을 수 있으며, 수술 중에 두개골 창을 가로질러 앉아 스테인레스 스틸 또는 플라스틱으로 만들어진 (1) 지원 플레이트 (2) 위치에 바늘을 보유하고 있으며 바늘의 회전을 허용하는지도 튜브 및 끝에서 ~ 3mm에서 90도 구​​부린 및 회전 삽입로 이동됩니다 (3) 바늘.
  2. 두께 1-1.5 mm, 7 조각 ~ 10 X 30mm 직사각형 스테인리스 스틸 또는 투명 플라스틱 (1) 지원 플레이트를 만들기 위해 잘라. 1.5 인치 22 게이지 (BD 회사, # 305156)와 1.5 인치 25 게이지 (BD 회사, # 305127) 주사 바늘을 준비합니다. 지도 튜브하려면, 플라스틱 종료하고 그 총 길이가 31-32mm (2)에 관한 있도록 22 게이지 주사 바늘의 낮은 바늘 끝을 잘라. 모래 금속 끝을은 평평하고 부드럽게 만들 수 있습니다. 이 유도 관의 마지막 길이는 25 게이지 주사 바늘보다 짧은 5~6mm에 대해해야합니다.
  3. 바늘이 금속의 가장자리에 수직되어 있는지 확인하고, 지원 접시에지도 튜브를 해결하기 위해 cyanoacrylate 접착제를 사용하십시오.
  4. <....

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토론

아래 부분을 잘라냄 모델은 외상후 epileptogenesis를 공부를위한 고효율 시스템입니다. 전형적인 수술을 완료하는 데 약 20-30분 소요하고, evoked 또는 자연 epileptiform 활동이 이주 수술 후 1-2 대부분의 동물에서 슬라이스에 기록하실 수 있습니다. 더 중요한 건,이 모델은 출혈, 염증, 부종, axotomy와의 연결을 죽음 7과 같은 외상성 뇌 손상 다음과 같은 변경 사항을 모방한 것이었 지요. 뿐만 아니라이 설치류 및 다른 동물에 epileptiform 활동 관찰되었으며,뿐만 아니라 간질 발작은 대뇌 피질의 병변 비교 8 고통을 인간에 설명되어있다. 큰 진전은 최근 몇 년 사이에 근본적인 메커니즘을 명료하게하다하기 위해 만든되었습니다. 자연과 evoked interictal epileptiform의 방전은> 2 주 병변 후 뇌 슬라이스에 기록되었으며, 이러한 활동은 쥐의 대뇌 피질의 계층 V 1에 발생한 것으로되.......

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공개 사항

관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

감사의 글

이 작품은 척수 및 건강의 인디애나 국무부에서 뇌 손상 연구 기금에서 NIH / NINDS 부여 4R00 NS 057,940, 그리고 부여 SCBI 200-12에 의해 지원되었다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
재료 이름 유형 회사 카탈로그 번호
Foredom micromotor 키트 장비 Foredom K.1070
1.5 인치 22 게이지 주사 바늘 자료 BD 회사 305156
1.5 인치 25 게이지 주사기 바늘 자료 BD 회사 305127
Cyanoacrylate 접착제 자료 테드 펠라 14,450

참고문헌

  1. Hoffman, S. N., Salin, P. A., Prince, D. A. Chronic neocortical epileptogenesis in vitro. J Neurophysiol. 71, 1762-1773 (1994).
  2. Topolnik, L., Steriade, M., Timofeev, I. Hyperexcitability of intact neurons underlies acute development of trauma-relat....

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