intraluminal 중간 대뇌 동맥 폐색 (MCAO) 모델은 실험 허혈성 뇌졸중 모델 중 가장 자주 사용되는 모델입니다. 여기서 우리는 전체 레이저 도플러 flowmetry의 가이드와 함께 상세하게 모델 및 대표 결과를 보여줄 것입니다.
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방법 논문
마우스의 레이저 도플러 Flowmetry 안내와 허혈성 뇌졸중에 대한 중간 대뇌 동맥 Intraluminal 폐색 (MCAO) 모델
* These authors contributed equally
이 논문에서
요약
초록
스트로크 2009 1,2 년 미국에서 근처 70,000,000,000달러의 예상 비용, 죽음의 세 번째 주요 원인과 세계에서 장애의 주요 원인이다. intraluminal 중간 대뇌 동맥 폐색 (MCAO) 모델 쥐에 impactful 인간의 병리 현상을 시뮬레이션하기 위해 1986 년 고이즈미 사에 의해 개발되었습니다. MCAO 방식의 수정은 나중에 롱가 3 수여되었다. 두 기술은 널리 허혈성 뇌졸중 및 잠재적인 치료 modalities 5로 인한 뇌 손상의 분자 메커니즘을 식별하는 데 사용되었습니다. 쥐이 비교적 비침 투 방법은 유전자 변형과 녹아웃의 변종 6,7을 활용하는 마우스에 사용하도록 확장되었습니다. 모델 초점 대뇌 국소 빈혈하려면, intraluminal 봉합은 MCA의 기반을 막다하기 위해 내부 경동맥을 통해 고급입니다. 지정된 기간 후에 Retracting 봉합사는 자연 reperfusion을 모방한 것이었지만, 봉합도 영구적으로 유지하실 수 있습니다. 이 동영상은 stepwise 방식의 생쥐에 intraluminal MCAO 절차를 수행하기위한 두 가지 주요 접근 방식을 보여주는,뿐만 아니라 잠재적인 단점과 함정에 대한 통찰력을 제공합니다. 허혈성 뇌 조직은 이후 대뇌 경색 8 정도를 평가하는 2,3,5 - triphenyltetrazolium 염화물 (TTC)로 물들일 것이다.
프로토콜
이 프로토콜은 기관 애니멀 케어 승인 및 플로리다 대학에서위원회 (IACUC)를 사용하고 "연구소 동물 관리의 원리"(NIH 간행물 번호 86-23, 1985 개정) 준수가되었습니다.
1. 자료
- 동물 : 수술 시에 20-26그램 무게 남성 C57BL / 6 마우스 (할렌 연구소, 인디애나 폴리스, IN, 미국).
- 마취 :
- 마취 기계 : VetEquip의 흡입 마취 시스템 (VetEquip 주식 회사, 플레즌턴, CA, 미국).
- 마취 흡입 : Isoflurane (백스터 조제학, 디어 필드, IL).
- 수술 도구 : SuperCut 이리스 가위, 스트레이트 (세계 정밀 계측기, 주식 회사, 사라소타, 플로리다, 미국), Vannas 마이크로 가위, 직진 (세계 정밀 계측기, 주식 회사, 사라소타, 플로리다, 미국), 더몬트 포셉 (좋은 팁, 45 ° 벤트 팁, 세계 정밀 계측기, 주식 회사, 사라소타, 플로리다, 미국), 바이폴라 응고 장치 (고주파 건조기 900 세계 정밀 계측기, 주식 회사, 사라소타, 플로리다, 미국), 마이크로 선박 클립 (세계 정밀 계측기, 주식, 사라소타, 플로리다, 미국)
- 외과 용품 : ....
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토론
MCAO 모델은 murine 종의 대뇌 국소 빈혈을 복제 설립 모델입니다. 이 모델은 처음 쥐에 사용하고 이후 마우스에 적응했다. 혈액 뇌 장벽의 투자율과 intracranial 압력에 대한 수술 조작의 영향을 제거하는 craniectomy을 방지하는 것이이 기술의 장점입니다. 그러나, 이러한 스트레인과 관련된 차이가 10, 폐색 6, 체온 12, 마취 13 봉합 팁 11 기간의 크기 및 기타 요인에 많은 변수를이 모델에서 경색 볼륨에 불일치가 발생할 수 있습니다.
언급을 보증 구체적인 기술적인 세부 사항이 있습니다 :
- 코팅 봉합사의 끝 감소 천공의 위험이있는 MCA를 occluding위한 부드럽고 관리 치료를 생성합니다.
- 인접한 동맥에서 미주 신경 정말 그것은 실수로 칼라 봉합에 있으니까 별도로 안전하게 제한되지 않습니다. occluding의 봉합을 오름차순 동안 arteri.......
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공개 사항
저자들은 이익에 대한 갈등이 없다는 것을 선언합니다.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 | |
|---|---|---|---|---|
| 시약의 이름 | 유형 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 (옵션) |
| 남성 C57BL / 6 마우스 | 동물 | 할런 연구소, 인디애나 폴리스, IN, 미국 | 20-26 GRS | |
| 해부 현미경 | 현미경 | Leica 스테레오 현미경 MZ6 | 6.3:1 줌 | |
| 광섬유 조명기 | 조명기 | TechniQuip 주식, 리버 모어, CA, 미국 | FO1 - 150 | |
| Isoflurane | 마취 | 백스터 조제학, 디어 필드, IL | 1001936060 | |
| 직선 SuperCut 이리스 가위, | 수술 도구 | 세계 정밀 계측기, 주식 회사, 사라소타, 플로리다, 미국 | 14,218 | |
| Vannas 마이크로 가위, 직선 | 수술 도구 | 세계 정밀 계측기, 주식 회사, 사라소타, 플로리다, 미국 | 14,003 | |
| 더몬트 좋은 팁 포셉 | 수술 도구 | 세계 정밀 계측기, 주식 회사, 사라소타, 플로리다, 미국 | 503290 | |
| 선박 클립 | 수술 도구 | 세계 정밀 계측기, 주식 회사, 사라소타, 플로리다, 미국 | 14,120 | |
| 고주파 건조기 900 | 수술 도구 | 세계 정밀 계측기, 주식 회사, 사라소타, 플로리다, 미국 | 500397 | |
| 7-0 외과 나일론 monofilament의 봉합 | 봉합하다 | Ethicon, 주식 회사, 서머빌, 뉴저지, 미국 | 1647G | 폐색에 대한 봉합 |
| 7-0 외과 실크 봉합 | 봉합하다 | Ethicon, 주식 회사, 서머빌, 뉴저지, 미국 | 7733G | 결합에 대한 봉합 |
| 실리콘 RTV 접착제 | 실리콘 고무 | 세계 정밀 계측기, 주식 회사, 사라소타, 플로리다, 미국 | 1571 | |
| Vetbond | 조직 접착제 | 3M 회사, 세인트 폴, 미네소타, 미국 | 70200746587 | |
| Puralube 베트 연고 | 아이 연고 | Pharmaderm, 멜빌, NY, 미국 | ||
| Buprenorphine hydrochlorode | 진통제 | Hospira 주식 회사, 레이크 포레스트, IL, 미국 | NDC 0409-2012-32 | |
| 열 소작 단위 | 세계 정밀 계측기, 주식 회사, 사라소타, 플로리다, 미국 | 501292 | ||
| PeriFlux 시스템 5000 | TCD flowmetry | Perimed, 스톡홀름, 스위든 | ||
| BAT - 12 | 직장 온도계 | 세계 정밀 계측기, 주식 회사, 사라소타, 플로리다, 미국 | BAT - 12R | |
| T / 펌프, TP600 | 열 담요 | Gaymar, NY, 미국 | ||
| 2,3,5 - triphenyltetrazolium 염화 | 시약 | 시그마 - 알드리치 (주), 세인트 루이스, MO, 미국 | T8877 | |
| 마우스 뇌 매트릭스 슬라 이서 | 브레인 슬라 이서 | Zivic - 밀러 연구실., 주식 회사, 앨리슨 공원, PA, 미국 | BSMAS001 - 1 |
참고문헌
- Recommendations on stroke prevention, diagnosis, and therapy. Report of the WHO Task Force on Stroke and other Cerebrovascular Disorders. Stroke; a journal of cerebral circulation. 20, 1407-1431 (1989).
- Lloyd-Jones, D.
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