쥐 모델에서 Transcranial 집중 초음파를 사용하여 혈액 - 뇌 장벽의 MRI를 유도 장애

요약

혈액 - 뇌 장벽 (BBB)​​의 Microbubble-매개 집중 초음파 장애는 두뇌의 비침습 타겟 약물 전달을위한 유망 기술입니다 ^1-3. 이 프로토콜은 쥐 모델에서 MRI를 유도 transcranial BBB 장애에 대한 실험 절차를 설명합니다.

초록

혈액 - 뇌 장벽 (BBB)의 초점 초음파 (FUS) 혼란은 BBB ^1-5 우회 위해 점점 더 조사 기법입니다. 덜 크기가 ^6에서 약 500 다보다 분자로 뇌 조직에 vasculature에서 분자의 통과 제한으로 BBB는 뇌 장애의 제약 치료에 중요한 장애물이다. FUS 유도 BBB 장애 (BBBD)는 화학 물질 이상의 장점은 고도화된 됨으로써 BBBD 일으킬 의미 임시 및 ⁴ 가역하고 있습니다. FUS 유도 BBBD 달리 충분한 농도의 조직에 deliverable 않을 두뇌에 치료 요원들이 다양한 효과를 조사하는 수단을 제공합니다. 초음파 파라미터의 다양한 범위 BBB ^2,5,7을 방해 성공적으로 증명했지만, 정확한 타겟팅과 성공적인 중단을 보장하기위한 실험 절차의 몇 가지 중요한 단계가 있습니다. 이 protoc좋았 윤곽선은 얼마나 중요한 동물의 준비와 실험의 microbubble 처리 단계를 중심으로 쥐 모델에서 BBBD 유도된 MRI-안내 FUS을 달성합니다.

프로토콜

1. 초음파 및 MRI 설치

MRI 호환 세 축 집중 초음파 시스템은 (FUS 인 스트 루먼트 주식 회사, 토론토, 온타리오, 캐나다) 본 연구에서 사용되었다. 두 개의 서로 다른 초음파 트랜스 듀서가 사용되었습니다 통합과 내부 건설 551.5 kHz에서 이리저리 중심 변환기는 (곡률 반경 = 60mm, 외부 직경 = 75mm, 내경 = 20 ㎜)과 1.503 MHz의, 8 섹터 배열 PZT 수중 처음기 (Imasonic 주식 Voray-SUR-L'Orgnon, 프랑스)는 단일 요소 이리저리 초점 변환기 (= 0.8, 조리개는 = 10 센티미터 FN)로 구동. MRI 호환 PVDF 수신기 ⁸ 551.5 kHz에서 변환기가 사용되었을 때 음향 방출을 기록하는 데 사용되었다. 서로 다른 장비를 사용하는 경우, 다음은 제안된다 :

1. 범위는 0.25 MHz의 -1.5 MHz 단위 중심 주파수 1 이하의 F-번호 (곡률 / 조리개 반경)와 적절한 보정 초음파 변환기를 선택합니다.
2. 물 목욕 Fi를 놓으십시오1.5 T 3 T MRI의 침대에 따뜻하고 degassed, 드 이온화 물로 카이로. 물 목욕은 동물을 보유할 수있는 최고의 플레이트가 있어야합니다. 수면에 직면하고, MRI 호환 세 ....

토론

동물과 microbubbles의 준비는이 절차의 가장 중요한 측면입니다. 동물의 머리에 머리를 완전히 초음파 빔을 attenuating 피하기 위해 제거해야합니다. BBB는 isofluorane 마취하에 중단될 수 있습니다 그러나, 그것은 일관된 개방을 달성하기 위해 더 어려워집니다.

그들을 위반하지 않도록하기 위해, 최대 그릴 때 microbubbles 항상 관심과 작은 게이지해서 다루어 져야, 큰 직경의 바늘을 사용해야합니다. 마찬가지로, 합리적으로 꼬리 정맥에서 사용할 수있는 가장 작은 게이지 카테터는 (22 게이지가 권장된다) 고용해야합니다. 작은 카테터가 정맥의 적절한 배치를 달성하기 위해 필요한 경우 다음 여분의주의가 microbubble 주사하는 동안 촬영해야합니다. microbubble 주사는 항상 천천히 수행되어야한다.

버스트 모드 sonications 항상 고용되어야한다. 지속적인 웨이브 sonication.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
시약의 이름	회사	카탈로그 번호
작은 동물들은 초음파 시스템을 중점	FUS 인 스트 루먼트 주식 회사	RK-100
Definity	Lantheus 의료 이미징
Omniscan	GE 헬스케어