알레르기 천식의 실험 마우스 모델은 질병 pathogenesis를 공부하고 새로운 치료제 개발에 새로운 가능성을 제공합니다. 이러한 모델은 잘 알레르기 면역 반응,기도 염증과 폐의 pathophysiology을 규제하는 측정 요소에 적합합니다.
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이 논문에서
요약
초록
천식은 전세계에 걸쳐 300 만명에 영향을 미치는, 병적 상태와 사망률의 주요 원인입니다. 미국 인구의 1 이상 8%는 그런 상황을 증가와 함께, 천식이 있습니다. 2 크게 촉진 다른 질병, 알레르기기도 질환의 동물 모델과 마찬가지로 기본 pathophysiology의 이해는 잠재적인 치료 표적을 식별하는 데 도움이, 그리고 가능한 새로운 치료법의 잠복기 테스트를 허용합니다. 알레르기기도 질환의 모델은 여러 동물의 종류로 개발하지만, murine 모델은 저렴한 비용, 준비 가용성 및 이들 동물의 잘 특성화 면역 체계로 인해 특히 매력적입니다되었습니다. 유전자 변형 종자 다양한 3 가용성이 더욱 매력을 증가 이러한 모델. 우리가 알레르기기도 질환의 두 murine 모델을 설명하는 다음 4 항원과 같은 고용 ovalbumin 둘. intraperitoneal 주사에 의한 초기 sensitization 한 모델 deliv 따라nebulization, intratracheal 전달하여 다른 의한 항원 도전 ERS. 이 두 모델은 각각 인간의 천식의 주요 기능을 흉내낸과 함께 상호 보완적인 장점을 제공합니다. 5
와 eosinophil 풍부한기도 염증, 급성 천식의 주요 기능은 methacholine (AHR기도 hyperresponsiveness)와 같은 자극에 과장기도 응답을 포함합니다. 이들은 또한 murine 모델, 5,6의 알레르기 항원의 도전 저명한 효과이며 우리는 그들을 측정하는 기술을 설명하기 때문에 실험 조작의 효과를 평가. 특히, 우리는기도 hyperresponsiveness을 측정뿐만 아니라기도와 폐에 염증 세포의 침투를 평가하기위한 방법에 대해 모두 7 침습과 비침습 8 기법을 설명합니다. 폐 조직 병리학은 장기에 걸쳐 염증의 마커를 평가하는 데 사용되는 동안기도 염증 세포 bronchoalveolar 세척에 의해 저장됩니다. 이들기술은 인간 불가능했을 방법으로 천식을 공부위한 강력한 도구를 제공합니다.
프로토콜
I.의 알레르기 항원의 Sensitization 및 챌린지 (그림 1 참조)
Intratracheal 도전에 대한 대답
- 초기 sensitization 들어, ovalbumin 20 μg (; 시그마 - 올드 리치, 세인트 루이스, 미주리 OVA)과 함께 일 0에 다시 일 7 수컷이나 암컷 C57BL / 6 또는 BALB / C 생쥐 (6-8주 이전) intraperitoneally 투입 멸균 인산의 0.2 ML에 유화 알루미늄 수산화 2 MG (시그마 - 올드 리치)를 포함하는 식염수 (PBS)는 버퍼 또는 제어 등의 멸균 PBS의 0.2 ML 2 MG 알루미늄 수산화 함께.
- 적절한 항원과 도전 (예, 일 14, 16, 18, 및 20). 도전 과정은 다음과 같습니다.
- intraperitoneal 300ml의 혼합물 (IP) 주입 (90 밀리그램 / kg)과 xylazine (10 밀리그램 / ㎏)와 마우스를 마취. 마우스가 적어도 10 분 완전 anesthetized한지 확인하십시오.
- 45도 이상의 각도 작업 표면. 이 위쪽으로 복부 측면을 유지하는 표면과 상단 머리에 장소 마우스.
- 후크 t다시 머리를 잡고 앞 inciso....
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토론
알레르기기도 질환의 동물 모델은 임상 천식과 관련된 연구에 중요한 도구를 제공합니다. 다양한 수종과 항원을 고용하는 다른 모델의 번호가 개발되었습니다. 마우스, 매력적이고 자주 사용되는 실험 동물들은 또한 알레르기기도 질환의 모델에 대한 장점을 제공합니다. 9,10를 같은 모델을 재현해 특히 어렵게되는 만성 질병의 양상과 모든 점에서 천식, 11을 모방 있지 않지만, 12,13 우리는 주요 기능 중 많은 복제되었는지 여기를 확인하십시오. 우리는 또한 인간의 천식에서와 같이 이러한 기능은 혈청 및 BAL 두 유체의 항원에 특정한 IGE의 증가와 관련되어 있는지 보여줍니다. 우린 두 murine 모델, 항원과 같은 고용 OVA 모두를 제시하지만 다른 도전을 기술을 활용. Intratracheal 행정부는 다소 복잡하고 시간이 많이 걸리는 것이지만, 직접 항원의 알려진 수량을 전달하는 장점을 제공합니다폐. 그것은이 방법으로 할 대안보다 폐암에 더 깊이 항원을 전달 수도 .......
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공개 사항
동물 실험 프로토콜 # V010-10 아래 애틀랜타 VAMC IACUC위원회가 정한 지침과 규정에 따라 수행되었다.
감사의 글
이 작품은 NIH 그랜트 HL093196 (RCR)와 애틀랜타 연구 및 교육 재단 (AREF)에 의해 지원되었다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 자재 명칭 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
| Ovalbumin | 시그마 - 올드 리치 세인트 루이스, 미주리 | A5503 | |
| 알루미늄 수산화물 | 시그마 - 올드 리치 | 239,186 | |
| 아세틸-β-methylcholine 염화 | 시그마 - 올드 리치 | A2251 | |
| Pentobarbital 나트륨 소금 | 시그마 - 올드 리치 | P3761 | |
| 온 몸이 plethysmography (WBP) 시스템 | Buxco 연구 시스템 윌밍턴, 노스캐롤라이나 | http://www.buxco.com | |
| FlexiVent | SCIREQ 주식 회사 몬트리올, 캐나다 | http://www.scireq.com | |
| 가벼운 현미경 | Leica 마이크로 시스템즈 주식 회사 버팔로 그로브, 일리노이 | ||
| Cytospin 4 | 써모 과학 애쉬빌, 노스캐롤라이나 | ||
| 비교 - 빠른 착색 | 지멘스 뉴어크, DE | B4132-1A | |
| 반복 피펫 | Tridak Torrington, CT | STP4001-0025 |
참고문헌
- Braman, S. S. The global burden of asthma. Chest. 130, 4S-12S (2006).
- Akinbami, L. J., Mooman, J. E., Liu, X. Asthma Prevalence, Health Care Use, and Mortality: 2005-2009. National Health Statistics Reports. 32, National Center for Health Statistics. Hyattsville, MD. 2005-2009 (2011).
- Bates, J. H., Rincon, M., Irvin, C. G.
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