뼈 전이의 pathogenesis에서 angiogenesis가 중요한 공정이므로 이미징 및 치료를위한 목표를 나타냅니다. 여기서는 특정 사이트 유방암 골 전이의 쥐 모델을 제시하고 비 invasively 이미지 angiogenesis에 전략을 설명 생체내에서 자기 공명 영상, 체적 계산의 tomography와 초음파를 사용하여.
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방법 논문
자기 공명 영상, 체적 계산의 Tomography 및 초음파를 이용한 유방암의 뼈 전이의 누드 쥐 모델에서 Angiogenesis의 멀티 모달 이미징
이 논문에서
요약
초록
Angiogenesis는 암 성장과 전이 형성의 필수적인 기능입니다. 뼈 전이에 angiogenic 요인 골수 캐비티에서뿐만 아니라 지역의 뼈 파괴의 결과로 종양과 뼈 세포의 상호 작용에 대한 종양 세포 증식을위한 필수적입니다. 우리의 목표는 비침습 이미징 기술을 이용하여 골격 병변의 angiogenesis의 생체내 평가에있게 실험적인 골 전이의 모델을 개발하는 것이었습니다.
이를 위해, 우리는 각각의 뒷다리 다리 하나가 아닌 다른 신체 부분에서 metastases의 성장하는 걸로 외면 상복부의 동맥에 10 5 MDA-MB-231 인체 유방암 세포를 주입. 종양 세포 접종 후 25-30일 따라 특정 사이트 뼈 metastases는 말초 대퇴골, 근위 경골과 비골 근위 1로 제한, 개발합니다. angiogenesis의 형태학의 기능적인 측면은 뼈 메타에 길이 방향 조사 수자기 공명 영상 (MRI), 체적 계산 tomography (VCT)과 초음파 (미국)를 사용 stases.
MRI는 처음 골수 캐비티로 제한하고 진행하면서 이후 피질 골을 초과되고 뼈 metastases의 연조직 부분에 morphologic 정보를 표시합니다. 동적 대비 향상된 MRI를 지역 혈액 볼륨, 관류 및 혈관 투과성을 포함하여 (DCE-MRI) 기능이 데이터가 취득하고 2-4 계량하실 수 있습니다 사용하기. 뼈 파괴는 형태학의 VCT 이미징을 사용하여 높은 해상도로 캡처된다. MRI 결과에 대한 보완, osteolytic 병변은 intramedullary 종양 성장의 사이트에 인접한 찾을 수 있습니다. 콘트라스트 에이전트 응용 후, VCT 혈관 조영술은 고해상도의 뼈 metastases에서 macrovessel 아키텍처를 보여, 그리고 DCE-VCT는 이러한 병변 5,6의 microcirculation에서 통찰력을 가능하게합니다. 미국 인해 골격에 병변에서 형태학의 기능적인 특징을 평가에 적용피질 골 지역 osteolysis. B-모드와 도플러 기법을 사용하여 부드러운 조직 metastases의 구조와 관류는 각각 평가할 수있다. DCE-우리 microbubbles 7 주입 후 뼈 metastases의 vascularization의 실시간 영상을 허용합니다.
결론적으로 특정 사이트 유방암 뼈의 모델 MRI, VCT 이러한 골격 병변의 형태와 angiogenesis의 기능적 매개 변수에 대한 미국의 제안은 상호 보완적인 정보를 포함한 멀티 모달 이미징 기술을 metastases.
프로토콜
1. 세포 배양
- 문화 MDA-MB-231 RPMI-1640의 인간 유방암 세포 (미국 유형 문화 수집) (Invitrogen, 독일) 10 % FCS (시그마, 독일)와 함께 보충. 모든 표준 조건 하에서 문화 (37 ° C, humidified 분위기, 5 % CO 2)와 통과 세포에게 3 배 주에 그들 대수 성장을 유지하는 보관하십시오. 아래에서 설명하는 동물 모델의 경우 종양이 장면 속도가 90 % 이상 1 등 MDA-MB-231 세포의 뼈 특정 sublines 사용을위한 필요가 없습니다.
- PBS-2에서 MM EDTA (에틸렌 다이아 민 테트라 초산)를 사용 후 수확 하위 합류 종양 세포 (칼슘이없는 식염수 인산 버퍼 + 및 MG 2 +) 및 0.25 % 트립신 (시그마, Taufkirchen, 독일). 백작 MDA-MB-231 Neubauer의 챔버에있는 세포 및 RPMI-1640에서 그들을 정지 (1 ML에서 5x10 5 셀).
2. 뼈 전이의 누드 쥐 모델
- 모든 실험은 책임이 정부 애니마 승인되었다리터 윤리위원회.
- 6~8주의 나....
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토론
이미징 절차와 함께 여기에 제시된 실험 뼈 metastases를 일으킬 방법은 길이 방향 누드 쥐에 osteolytic 병변을 후속 수 있습니다. 우리의 모델에서는 MDA-MB-231 인체 유방암 세포 pudendoepigastric 몸통과 대퇴 동맥을 통해 장골의 동맥 사이의 문합입니다 바다로 주입됩니다. 따라서 무릎 관절의 제공된 영역으로 혈액의 흐름은 바다를 내고 이후에 유지됩니다. 에 비해 뼈 전이의 설립 모델에 비해이 모델의 장점은 intracardiac 사출 모델 11 및 대상 조직에 종양 세포 넘쳐 흐름 및 마이 그 레이션의 병원성 프로세스의 포함에 비해 뼈 metastases의 사이트 특정 모양입니다 경골 주입 모델 12. 또한,이 모델에서는 조직의 종양의 부담은, 특히 내장의 보급에 SE 이상의 종방향 연구를 허용하는 생략따라서 veral 주 그리고는 필요한 동물 1,13의 감소 수 있습니다.
뼈 전이.......
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공개 사항
관심의 어떠한 충돌 선언 없습니다.
감사의 글
이 작품은 독일 Forschungsgemeinschaft (SFB-TR 23 SFB-TR 79, TB 및 디케이)에 의해 지원되었다. 저자는 훌륭한 기술 지원을 위해 Leotta와 리사 Seyler 카린, Renate Bangert 감사드립니다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 시약의 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | |
| MDA-MB-231 인체 유방암 세포 | 미국 유형 문화 수집 (ATCC) | HTB-26 | |
| RPMI-1640 | Invitrogen | 61,870 | |
| FCS | Invitrogen | 10,270 | |
| 트립신-EDTA (에틸렌 다이아 민 테트라 초산) | Invitrogen | 25,300 | |
| Carprofen Rimadyl | 화이자 | PZN 110,208 | |
| Magnevist | 바이엘 - Schering | PZN 6,961,516 | |
| Imeron 400 MCT | Bracco | PZN 228,654 | |
| SonoVue | Bracco | PZN 1,567,358 | |
| Papaverin | 알파 Aesar | L 04,152 | |
| Isofluran | 벡스터 | 9623을 HDG | |
| 심포니 (자기 공명 영상) | 지멘스 | ||
| 볼륨 중부 표준시 (체적 계산 tomography) | 지멘스 | ||
| Acuson Sequioa 512 (초음파) | 지멘스-Acuson |
참고문헌
- Bäuerle, T. Characterization of a rat model with site-specific bone metastasis induced by MDA-MB-231 breast cancer cells and its application to the effects of an antibody against bone sialoprotein. Int. J. Cancer. 115, 177-186 (2005).
- Merz, M., Komljenovic, D., Zwick, S., Semmler, W., Bäuerle, T.
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