방법 논문

손쥐 태아 Echocardiography

DOI:

10.3791/4416

⸱

2013년 2월 15일

1Department of Medicine, Section of Cardiology, Institute for Cardiovascular Research, University of Chicago

이 논문에서

요약

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심장 개발에 영향을 미치는 유전자 변경을 공부할 때 태아 및 perinatal 죽음은 일반적인 기능입니다. 고주파 초음파 이미징은 2-D 해상도를 개선하고 조기 심장 개발에 우수한 정보를 제공 할 수 있으며 죽기 전에 심장 구조와 기능에 미치는 영향을 감지 할 수있는 이상적인 방법입니다.

초록

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심장 개발과 기능의 이상을 표시하는 유전자 변형 마우스에 대한 이해를위한 강력한 도구를 나타냅니다 정상적인 심장 혈관 기능과 인간의 심장 혈관 질병의 pathophysiological으로 모두를 근간 분자 메커니즘. 심장 개발 1-3에 영향을 미치는 유전자 변경을 공부할 때 태아 및 perinatal 죽음은 일반적인 기능입니다. 심장 기능의 초기 개발에 유전 적 또는 pharmacologic 변경의 역할을 연구하기 위해, 라이브 태아의 초음파 영상은 이상과 세로 후속의 조기 인식을위한 중요한 도구로 자리 잡았습니다. 비 침투 초음파 영상은 선천성 기형 및 사망 4 전에 심장 기능에 미치는 영향을 감지하고 공부하기에 이상적인 방법입니다. 그것은 살아있는 태아과 질병의 진행에 이상을 조기에 인식이 종 방향 연구 5,6와 자궁에 따라 할 수 있습니다.최근까지 태아 마우스 마음의 영상이 자주 침입 방법을 참여. 태아는 자기 공명 현미경과 전자 현미경을 수행하거나 수술 transillumination 현미경에 전달하기 위해 희생해야했습니다. 기존의 2-D 및 펄스 파 도플러 영상과 고주파 프로브의 응용 프로그램은 6-10 구할 정상적인 발달 변화의 데이터베이스와 태아의 개발 기간 동안 심장 수축과 심장 속도 측정을 제공하기 위해 표시되었습니다. , 적절한 이미징 비행기가 종종 취득하기가 어렵습니다하지만, M-모드 영상은 또한 중요한 기능 데이터를 제공합니다. 태아의 고주파 초음파 이미징은 2-D 해상도를 개선하고 심장 구조 11 초 개발에 우수한 정보를 제공 할 수 있습니다.

프로토콜

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1. 영상에 마우스를 준비

  1. 이미징 연구에 앞서, 유도 챔버에있는 댐 (2~3% isoflurane)을 마취. 유도 챔버에서 동물을 제거하고 즉시 마취 시스템에 연결된 코 콘 안에 주둥이를 넣습니다. 헤어 가위로 중간 가슴 수준에서 낮은 사지 (그림 1 참조)에 털을 제거합니다. 탈모 크림과 함께 나머지 몸 머리를 제거합니다. 탈모 용 크림도 머리 가위없이 사용할 수 있으며, 철저하게 자극을 방지하기 위해 사용 후 피부에서 헹구어해야합니다.
  2. 임베디드 ECG와 가열 패드에 위로 향한 위치에 anesthetized 마우스를하면 체온 (그림 1)을 유지하기 위해 연결됩니다. 네 개의 발과 ECG 전극에 테이프를에 전극 젤을 적용합니다.
  3. 절차를 통해 정상 상태 진정 작용 수준을 (100 % O 2 혼합 1.0 %로 1.5 % isoflurane) 구합니다. 마취의 수준으로 조정할 수 있습니다 m450 목표 심장 박동수 ± 분 당 50 비트 (BPM)를 aintain. 조심스럽게주의 미만 1 시간 진정 작용의 isoflurane과 기간의 복용량을 최소화하기 위해 지불해야합니다.
  4. 부드럽게 가열 패드를 통해 체온을 모니터링하기 위해 직장 프로브를 (윤활....

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토론

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시리얼 측정을 수행 할 수 있으며 심장 결함과 돌연변이 태아를 감지 할 수있는 능력은 정상과 비정상 심장 혈관 개발 조사를위한 echocardiography의 유용성을 강조 표시합니다. 생체의 심장 구조와 기능의 분석은 정상 태아 발달에 유전 및 비 유전 수정의 설명에 중요한 부분이되었습니다. 2D-가이드 도플러의 사용 가능 여부는 실시간으로 이미지를받는 동안 가능한 심장 박동, 혈액 흐름 패턴을 모니터링 할 수 있습니다. 이러한 심실 septal 결함 등의 발달 심장 결함이 존재하고 감지 할 수 있습니다. 대부분의 시스템에서 색상 흐름 도플러 영상의 부족이 어려운 고해상도 2D 이미지 도플러 샘플 볼륨을 정렬 할 수 있도록 현재의 이미징 플랫폼의 고해상도 기능에도 불구하고, 최고 유출의 속도의 인수, 어려운되고 있습니다. 또한, 자궁 뿔 내의 태아 위치는 배제 될 수모든 측정 또는 차선 이미지를 생성합니다. 초음파 영상의 주요 제한은 하나의 댐에서 모든 배아를 시각화 할 수있는 능력을 제한 깊이를 스캔합니다........

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공개 사항

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관심 없음 충돌이 선언 없습니다.

감사의 글

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GHK는 NIH / NHLBI K08-HL098565 시카고 대학 심혈관 연구소에 의해 지원됩니다. 설명 모든 실험 방법은 시카고 대학에서 기관 동물 케어 및 사용위원회에 의해 승인됩니다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
Vevo 770 이미징 시스템 VisualSonics (토론토, 캐나다)
RMV707B.15-45 MHz의 변환기
TEC 3 Isoflurane Vaporizer
Isoflurane (2 - 클로로 -2 - (difluoromethoxy) -1,1,1 - trifluoro - 에탄)

참고문헌

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  1. Wessels, A., Sedmera, D. Developmental anatomy of the heart: a tale of mice and man. Physiol. Genomics. 15, 165(2003).
  2. Snider, P., Conway, S. J. Probing human cardiovascular congenital disease using transgenic mouse models. Prog. Mol. Biol. Transl. Sc....

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MB14 5

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