토끼를 대상으로 한 실험적 두개내 압력 조절 혈액 션트 지주막하 출혈(SAH) 모델은 쇄골하 동맥 삽관 및 경피적 수조 마그나 천자라는 표준 절차를 결합하여 SAH 후 인간의 병태생리학적 상태를 밀접하게 모방할 수 있습니다. 단계별 지침을 제시하고 성공적인 실험적 SAH 생성을 위한 주요 수술 포인트에 대해 논의합니다.
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이 논문에서
요약
초록
초기 뇌 손상 및 지연 뇌 혈관 경련은 모두 지주막 하 출혈 (SAH) 후 불리한 결과에 기여한다. 두 조건을 시뮬레이션 재현 및 제어 동물 모델은 현재 드물다. 따라서, 새로운 모델은 SAH로 인한 인간의 병태 생리 학적 조건을 모방하기 위해 필요하다.
이 보고서는 뇌내 압력 (ICP)의 제어를 가능하게 토끼 피 션트 SAH 모델의 기술적 인 뉘앙스를 설명합니다. 체외 션트는 동맥 폐쇄 시스템 및 두개골에 시험관 독립적 SAH있게 막밑 공간 사이에 배치된다. 단계별 절차 명령들 및 필요한 장비를 기술뿐만 아니라, 기술적 고려 최소 사망률과 질병률과 모델을 생성한다. 이 강력한 간단하고 일관성있는 ICP-제어 SAH 토끼 모델의 성공적인 수술 작성에 필요한 중요한 세부 사항은 설명한다.
서론
동맥류 성 지주막 하 출혈 (SAH)은 자주 영구적 인 신경 손상 또는 사망 한 선도, 신경 병리학 적 조건을 위협하는 가장 삶의 하나입니다. 과거의 연구는 SAH 2와 관련된 신경 학적 결손의 주요 원인으로 지연 뇌 혈관 연축 (DCVS)에 초점을 맞추고있다. 그러나, 혈관 경련의 치료 후 SAH 고통받는 환자의 일반적 나쁨 임상 결과는 SAH 3 초 후 뇌 손상 (EBI)의 효과를 포함하는 연구 초점이 팽창되었다. SAH 후 나쁨 임상 결과에 기여하고 EBI DCVS 모두의 중요성은 더 큰 이해 효과적인 치료 전략의 개발이 필수적이다.
지금까지, cisterna 마그나에 단일 및 이중자가 혈액 주입 DCVS 2-6의 연구를위한 SAH 유도를위한 표준 방법이었다. 일반적으로 이전의 연구에서 사용했지만,이 모델은 대부분 SAH와 관련된 신경 병리학 주요 변경 사항을 재생하지 못하는 EBI 7을 유도. 대조적으로, 혈관 천공 부분적 EBI (7)의 증상을 모방 중증 급성 병리 생리 학적 변화를 생성하는 것으로 알려져있다.
이 보고서는 SAH의 신규 한 토끼 모델이 기재된 방....
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프로토콜
2.5 무게 3 개월 된 여성 뉴질랜드 토끼 - 3.5 kg이 절차를 사용 하였다. 이 연구는 실험 동물의 관리 및 사용을위한 건강 지침의 국립 연구소에 따라 스위스, 베른 (승인 번호 13분의 105)의 광저우의 동물 관리위원회의 승인을 수행 하였다. 모든 수술은 베른, 스위스 베른 대학 병원에서 임상 연구학과의 실험 외과 연구소에서 무균 조건 하에서 수행 하였다. 동물 용 마취는 수술 중 및 복구에 걸쳐 동물을 모니터링.
1 동물 준비, 위치 및 쇄골 하 동맥 삽관
- 근육 마취제의 주입 토끼에서 전신 마취를 유도 (30 ㎎ / ㎏, Ketalar, 50 ㎎ / ㎖) 및 자일 라진 (kg 6 밀리그램 /; Xylapan 20 ㎎ / ㎖) 유해에 토끼의 반응을 확인하여 마취의 컨트롤 깊이 stimulat이온 (예를 들면, 발가락 핀치). 긍정적 인 반응의 경우에는 1.7를 참조하십시오.
- 양안의 하부 뚜껑 풀다운 건조 더욱 자극을 막기 위해 연고 눈꺼풀에 소량의 적용.
- , 20 Gbutterfly의 venflon (20 G 혈관 카테터)와 측면 귀 정맥 카테 테르를 꽂다 접착 테이프로 고정하고, 0.9 %의 염화나트륨을 포함하는 중력 가방 (500 ㎖ / 24 시간)와....
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결과
SAH의 토끼 피 션트 모델은이 보고서에서 설명하는 것은, 기저 피질 (그림 2A, B) 및 대뇌 혈관 (그림 2C)와 같은 초 24로 시간 부상 후 (B 그림 2A) 해마에서 EBI를 생산하고 특성을 나타낸다 혈액 분포 (그림 2D) 8. 또한,이 모델은 SAH 유도 (그림 3) 10 일 이후 세에 DCVS의 심한 정도가 적당한 트리거합니다. 급성 SAH시 호흡 정지 또는 심한 서맥 30 % 때문에 - 사망률은 20입니다. 거의 모든 토끼 일 1 ~ 신경 학적 결손의 점진적인 악화 보여 -. 3 10을 그 시점에서 동물은 마취하에 완전하다. 기술적 관점에서, 피 션트 모델 모두 시험관과 독립적으로 제어 가능한 SAH 유도 (도 4)을 허용한다.
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토론
션트 모델 급성 SAH 3,8,10 후에 인간에서 관찰되는 것과 유사한 병리 현상을 생성한다. 그것은 EBI는 악화 유지하고 심지어 DCVS 12 트리거 등이 모델 SAH를 다음 EBI와 DCVS 상호 작용을 포함하여 초기와 후기 DCVS 단계를 모두 조사에 도움이 될 수로 수 있음을 제안하고있다. 특히, 반복 생체 DCVS DSA (13)을 포함하여 모니터링 기술, 15 개 readibly 작은 실험 동물에 비해 토끼에 적용되는 컴퓨터 단층 촬영 혈관 조영술 (14) 및 경 두개 도플러. 시험관 독립적 자발적 SAH를 사용하는 것 이외에도, 모델은, 사용자가 다양한 심각성 정도 (또는 ICP 혈액의 양, 및 대뇌 재관류 압력 필연적 변화)에 대해 제어 할 수있다.
가장 중요한 것은, 급성 SAH 후 이벤트의 매우 일관된 재현하고, pathophysiologica.......
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공개 사항
없음. 저자는 사용된 약물, 재료 또는 장비에 대해 금전적 또는 상업적 이해관계가 없습니다. 이 작업에 대한 구체적인 자금은 받지 못했습니다. 저자는 제시된 연구의 설계 및 수행에 대해 전적으로 책임을 지며 이 연구에 사용된 재료 및 방법 또는 논문에 명시된 결과와 관련하여 이해 상충을 보고하지 않습니다. 그들은 윤리 기준의 준수를 확인합니다. 이 연구는 실험 동물의 관리 및 사용에 대한 국립 보건원 지침과 스위스 베른 주 동물 관리 위원회(승인 #109/07 및 #107/09)의 승인을 받아 수행되었습니다.
감사의 글
저자는 보스턴, MA 초안을 교정하기위한 교정 및 원고를 편집하고 Paskus 예레미야, 보스턴 아동 병원, 대한, 로리 폰 Melchner, 베른 대학교 의과 대학 신경 외과학 교실, 베른, 스위스 감사합니다. 우리는 다니엘 메틀, DVM, 최대 뮐러, DVM, 다니엘 Zalokar 및 Olgica Beslac, 실험 외과 학회, 임상 연구학과, 베른 대학, 베른, 스위스 동물 보호, 마취 및 수술 지원의 숙련 된 관리를 주셔서 감사합니다. 우리는 생리 학적 매개 변수의 실시간 데이터 모니터링 및 사후 처리를 위해, 마이클 Lensch, 헤드 연구 간호사, 중환자 의학 교실, 베른 대학 병원 베른 대학, 베른, 스위스 감사합니다. 우리는 우수한 실험실 기술 및 수술 지원, 에딘 Nevzati, 칼 Muroi, 그리고 살로메 Erhardt 감사합니다.
이 작품은 인텐시브의 부서에 의해 지원되었다전자 케어 의학, 베른 대학 병원 베른, 베른, 스위스, 임상 연구학과, 베른, 베른, 스위스의 대학의 대학 및 Kantonsspital 아라우, 아라우, 스위스에서 연구 기금. 우리는 그림 1과 2에 대한 무단 전재 허가를, 엘스 비어 감사합니다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 장비 | |||
| 작동 현미경 | Zeiss, Jena, Germany | Zeiss, OPMI-MD 수술 | |
| 현미경 수술 장비 | B. Braun, Germany | Forceps medical no. 5; 용기 가위 8cm; 마이크로클립 4mm | |
| 호흡기 | Hugo Sachs | ||
| 헤어 클리퍼 | 3M 수술용 클리퍼 | 스타터 키트 9667A | |
| 바디 웜 플레이트 | FHC | ||
| 혈액 가스 분석기 | 복사계, 코펜하겐, 덴마크 | ABL 725 | |
| 심장 모니터링 | Camino 다중 매개변수 모니터, Integra, Plainsboro, NJ, US | AP-05 | |
| 소프트웨어 분석 | BIOPAC Systems, Inc., Goleta, CA, USA | Biopac MP100 및 acqKnowledge 소프트웨어, 버전 3.8.1 | |
| 소프트웨어 분석 | ImagePro Discovery, MediaCybernetics, Silver Spring, MD, USA | Image-Pro Plus 버전 | |
| 혈관 조영술 장치 | DFP 2000 A-Toshiba | MIIXR0001EAA | |
| ICP 모니터 | Camino Laboratories, San Diego, CA, USA | ICP 모니터, 모델 110-4B | |
| 혈류 모니터 | Oxford Optronix Ltd., Oxford, UK | CAL KIT 마이크로스피어 솔루션 | |
| 레이저 도플러 유량 측정 미세 바늘 프로브 | Oxford Optronix Ltd., Oxford, UK | MNP110XP, 직경 0.48 mm | |
| 압력 튜브 | B. Braun, Germay | PE 1.0 mm × 2.0 mm | |
| 마취 모니터 | GE Medical Systems, 스위스 | Datex S5 모니터 | |
| 재료 | |||
| 20 G 혈관 카테터 | Smiths Medical | Jelco i.v. 카테터, REF 4057 | |
| 5.5 F 3루멘 중앙 정맥 카테터 | 커넥터, Tagelswangen, 스위스 | 실리콘 카테터 STH-C040 | |
| 22 G x 40 mm 바늘 | Emergo Group Inc., 네덜란드 | ||
| 고속 마이크로드릴 | Stryker, Solothurn, 스위스 | 5400-15 | |
| 뼈 왁스 | Ethicon, Johnson & Johnson, NJ, USA | ETHW31G | |
| 양극성 집게 | Aesculap, Inc., PA, US | US349SP | |
| 케타민 | 모든 제네릭 제품 | ||
| 자일라진 | 모든 제네릭 제품 | ||
| 부프레노르핀 | 모든 제네릭 제품 | ||
| 펜타닐 | 모든 제네릭 제품 | ||
| 경피 펜타닐 매트릭스 패치 | 모든 일반 제품 | ||
| 리도카인 1% | 모든 일반 제품 | ||
| 4% 파파베린 HCl | 모든 일반 제품 | ||
| Neomycin sulfate | Research Organics Inc., OH, USA | 모든 제네릭 제품 | |
| Povidone-iodine | 모든 일반 제품 | ||
| 0.9% 염화나트륨 | 모든 일반 제품 | ||
| Iopamidol | Abott Laboratories, IL, USA | 모든 제네릭 제품 | |
| 3-0 흡수성 봉합 | Ethicon Inc., 미국 | VCP824G | |
| 5-0 비흡수성 봉합 | Ethicon Inc., 미국 | 8618G | |
| 4-0 폴리필라멘트 봉합사 | Ethicon Inc., 미국 | VCP284G |
참고문헌
- Taylor, T. N., et al. Lifetime cost of stroke in the United States. Stroke; a journal of cerebral circulation. 27, 1459-1466 (1996).
- Kikkawa, Y., Kameda, K., Hirano, M., Sasaki, T., Hirano, K.
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