여기에서는 거부 반응의 면역학을 연구하기 위한 프로토콜을 제시합니다. 제시된 수술 모델은 짧은 수술 시간과 간결한 기술을 보여주었습니다. 기증자-수용자 균주 조합에 따라 이식된 신장은 간질성 섬유증 및 세뇨관 위축으로 정의되는 급성 세포 거부 반응 또는 만성 동종이식 손상이 발생할 수 있습니다.
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방법 논문
마우스 신장 이식 : 동종 이식 거부의 모델
* These authors contributed equally
이 논문에서
요약
초록
인간의 이식된 신장에 대한 거부 반응은 여전히 이환율과 사망률의 주요 원인입니다. 신장 이식의 마우스 모델은 인간 신장 이식에서 발생하는 기술적 및 병리학적 과정을 밀접하게 복제합니다. 신장 이외의 기관에서 동종 거부 반응에 대한 마우스 모델이 존재하고 기술적으로 더 실현 가능하지만, 예를 들어 심장 및 신장 동종 이식편에서 거부 반응의 시간 경과가 특정 균주 조합에서 크게 다르다는 것과 같이 서로 다른 기관이 서로 다른 거부 반응 모드와 역학을 유도한다는 증거가 있습니다. 이 모델은 기술적 어려움에도 불구하고 여러 가지 이유로 매력적인 도구입니다. 근친 마우스 균주 하플로타입이 잘 특성화되어 있기 때문에 기증자와 수혜자 조합을 선택하여 MHC 클래스 I 및 II 유전자좌에 이식하여 급성 동종이식 거부 반응을 모델링할 수 있습니다. 반대로, 유사한 일배체형을 가진 균주 사이에 이식함으로써, 동종이식, 신장에서 간질성 섬유증 및 세뇨관 위축이 발생하는 만성 과정을 유도할 수 있습니다. 수술 시간을 줄이고 수술 용이성을 개선하기 위해 수술 기법을 수정했지만, 모델을 충실하게 복제하기 위해서는 여전히 학습 곡선을 극복해야 합니다. 이 연구는 수술 절차의 요점을 제공하고 이 기술을 확립하는 과정을 돕습니다.
서론
이 길이와 수명이의 질 모두 향상을 제공하는 세계적으로 말기 신부전 환자를위한 혁신적인 치료되었다 이후 신부전의 치료에 성공적으로 신장 이식은 먼저 일란성 쌍생아 일 사이 1955에 기술되었다. 그러나 장기 이식 생존율은 만성 동종 이식 손상 3의 결과 병리학 적 과정의 무리에 의해 방해되었다.
인간에 이식 된 신장의 거부는 immunosupporessive 요법에서 상당한 개선에도 불구하고 사망률의 주요 원인이 남아있다. 신장 이식 마우스 모델을 개발하는 목적은 밀접 인간 신장 이식 4에서 발견 과정과 병리를 복제하는 것이다. Skoskiewicz 외는. 제 1973 5 신장 이식 마우스 모델을 설명했다. 미세 첨단 기술이 요구되고 있지만, 그것은 유용한 t이며여러 가지 이유로 OOL : 마우스 게놈이 잘 특징 및 실험 방법 및 마우스 연구에 사용할 기술의 큰 다양성이있다.
신장 이식 마우스 모델을 이용하여 많은 그룹은 그러나 실험 4의 기간 동안 현장에 남아있는 다른 연구와 수신자 마우스의 기본 신장의 우리의 기술 방법 하나, 생명 ....
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프로토콜
해당 국가 및 지역의 기관 윤리는 동물 실험을 수행하기 전에 장소에 있어야합니다. 받는 사람 외과 의사가 2.1 2.8로 수행하면서 특히 영국에서 다음과 같은 실험은 기증자의 의사가 수행해야이 microsurgeons가 동시에 작동 할 수있는 동물 (과학적인 절차) 법 1986에 따라 수행되었으며, 1.1-1.16 다음 3.1-3.5 단계 . 하나의 연산자를 들어 단계가 순서대로 수행 할 수 있습니다.
1 기부자 준비
참고 : 여기에 제시된 절차는 기증자 C57BL / 6 BM12 사람과받는 사람 20g보다 더 큰 체중과 8~16주 된 세 사이의 C57BL / 6 수컷 마우스입니다. 그러나이 과정은 재현성 마우스 균주의 다양한 수행 될 수있다. 대표적인 결과 섹션에 제시된 데이터는 C57BL / 6, C57BL / 6 BM12 및 BALB / c 마우스로부터 얻은 것입니다.
- 행동 절차 날기목적과 g 멸균 수술기구 및 소모품 (오토 클레이브)는, 가능한 한 무균 영역을 유지한다. 이 외과 의사를 사용할 수있는 경우받는 사람의 준비와 동시에 기증자 준비를 수행합니다.
- medetomidine (0.5 ㎎ / ㎏)와 케....
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결과
신장 이식 거부 반응은 이식 된 신장 (그림 2)의 methacarn 고정 파라핀 조직 절편의 조직 학적 분석에 의해 평가 될 수있다. 신장 허혈 재관류 손상에서 동계 쥐의 결과와 신장의 Isograft 이식 그러나 사주에 의해 세뇨관 복구 및 기본 신장 조직 학적으로 비교할 수있다. 급성 거부 반응은 신장 실질 조직 전반에 걸쳐 확산 단핵 세포 침윤이 간질, 사구체와 세뇨관을 포함,이 일주 내 BALB / c를받는 사람에 C57BL / 6 신장 이식에 의해 모델링 될 수있다. 만성 동종 이식 손상이 C57BL / 6받는 사람에 이식 C57BL / 6 BM12 신장에서 모델링 할 수 있습니다, 이것은 간질 섬유화 점진적인 세관 손실로 구성된 인간의 병리에서 볼 수있는 일반적인 기능을 발생합니다. 고성능 필드 (X200 배율) 당 총 세관의 수는 (Fi 접속 기능 네프론 질량의 정량화 할 수 있습니다gure 3), 세관의 손실이 거부로 인해 관상 부.......
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토론
동맥 문합을 수행하는 가장 잘 설명 된 방법은 수신자 대동맥으로 엔드 - 투 - 사이드 방식으로 이어져 신동맥와, 도너의 원위 대동맥을 사용하는 것이다. 우리는 더 편리한 것으로 우리가 믿는 인간 신장 이식으로 수행 'Carrell 패치'미러링 유사한 대동맥 패치의 사용을 설명한다. 기증자와받는 사람의 수술 시간의 문헌보고가 드문 드문 있지만 우리는받는 사람 대동맥에 엔드 - 투 - 사이드 기증자의 대동맥 대신받는 사람의 대동맥에 대동맥 패치를 사용하는 것이 바람직하다 생각합니다. 패치를 이용하면 모든 척추 도너 대동맥을 해부 분기 할 필요성을 부정하고, 또한 시간이 자연스럽게 제외 패치 anastomosing 같이, 개별적으로 결찰하는 데 걸리는.
이 모델을 달성하기 위해 중요한 단계는 동맥 패치 문합 내에서 신장 동맥 이외의 다른 동맥 내강이 없음을 확인하기 위해 돌보는 포함 그들은미세 혈관 클램프가 제거 될 때 누출됩니다. anastamoses를 구성 봉합.......
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공개 사항
저자가 공개하는 게 없다.
감사의 글
신장 연구 UK에서 자금, 에딘버러 및 장기 이식의 유럽 사회의 외과 의사의 왕 대학은이 연구를 지원했다.
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참고문헌
- Guild, W. R., Harrison, J. H., Merrill, J. P., Murray, J. Successful homotransplantation of the kidney in an identical twin. Trans. Am. Clin. Climatol Assoc. 67, 167-173 (1955).
- Wolfe, R. A., et al.
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