인간의 복강의의 Organotypic 문화 난소 암 보급의 초기 단계 모델링

Pamela N. Peters; Elizabeth M. Schryver; Ernst Lengyel; Hilary Kenny

doi:10.3791/53541

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방법 논문

인간의 복강의의 Organotypic 문화 난소 암 보급의 초기 단계 모델링

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DOI:

10.3791/53541

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2015년 12월 31일

Pamela N. Peters¹ , Elizabeth M. Schryver¹ , Ernst Lengyel¹ , Hilary Kenny¹

¹Department of Obstetrics and Gynecology, Section of Gynecologic Oncology, University of Chicago

이 논문에서

요약

여기에서는 난소암 세포의 부착, 침습 및 증식을 조사하기 위한 도구로서 일차 인간 중피 세포와 세포외 기질로 층을 이룬 섬유아세포로 구성된 복막강 내막의 3차원 체외 모델을 구성하는 프로토콜을 제시합니다.

초록

난소암 전이의 패턴은 혈액성으로 퍼지는 경우가 드물기 때문에 대부분의 다른 상피 종양과 현저히 다릅니다. 대신, 원발성 종양에서 박리된 난소암 세포는 복막액에 의해 복막강 내의 전이 부위로 운반됩니다. 이러한 부위, 특히 복복막과 망막은 중피가 늘어선 표면으로 덮인 기관입니다. 난소암 전파 과정을 조사하기 위해 우리는 시험관 내에서 복막강 내벽을 재구성하는 복잡한 3차원 배양 시스템을 조립했습니다. 1차 인간 섬유아세포와 중피 세포는 인간 망막에서 분리되었습니다. 그런 다음 섬유아세포를 세포외 기질과 혼합하고 1차 인간 중피 세포층으로 덮어 전이하는 난소암 세포가 직면하는 복막 및 난소 표면을 모방했습니다. 그 결과로 도출된 유기형 모델은 그림과 같이 암세포 부착, 침입 및 증식을 포함한 난소암 전파의 초기 단계를 조사하는 데 사용됩니다. 이 모델은 조기 난소암 전파에서 미세환경(세포 및 무세포)의 역할을 조사하기 위한 여러 연구에서 사용되었습니다. 또한 고처리량 스크리닝에 성공적으로 적용되었으며 난소암 전이 억제제를 식별하고 테스트하는 데 사용되었습니다.

서론

난소암은 가장 치명적인 부인과 악성 종양입니다¹. 대부분의 환자는 암이 복막강 전체로 퍼진 후에 진단을 받습니다. 일단 암이 복막강 전체로 퍼지면 종양축소 수술과 화학요법은 암 재발과 화학내성을 예방하기에 충분한 치료법이 되지 못하는 경우가 많아 5년 생존율이 30% 미만입니다. 난소암 전이는 주로 복막강에 국한되며, 위암, 췌장암, 대장암을 포함한 다른 여러 유형의 암은 복막강의 동일한 해부학적 부위로 전이됩니다. 일반적으로 난소암 세포는 나팔관 또는 원발성 난소 종양의 상피내암종에서 분리되어 복막액을 통해 단세포 또는 타원체로 이동하여 망막, 장 및 복벽의 중피가 늘어선 표면에 부착됩니다².

종양 미세환경은 많은 암에서 질병 진행과 화학 내성에 중요한 역할을 합니다^3-6. 복막강(peritoneal cavity)은 중피 세포 단층이 표면의 대부분을 덮고 있는 독특한 미세환경입니다(그림 1A)⁷. 중피 내벽(mesothelial lining)은 마찰이 적은 표면을 만드는 장벽 역할을 하며, 이는 암세포 부착을 방지하는 경향이 있습니다⁸. 이 중피가 늘어선 표면 바로 아래에는 주로 섬유아세포와 세포....