이 프로토콜은 트랜스 대퇴 액세스를 사용하여 apoE-/- 배경을 가진 쥐의 복부 대동맥에 인간 관상 동맥 스텐트를 이식하는 것을 설명합니다. 다른 동물 모델과 비교하여 뮤린 모델은 높은 처리량, 재현성, 취급 및 하우징의 용이성 및 광범위한 분자 마커의 장점을 가지고 있습니다.
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방법 논문
대퇴동맥 접근을 이용한 쥐 복부 대동맥에 인간 크기의 관상 동맥 스텐트를 이식
* These authors contributed equally
이 논문에서
요약
초록
관상 동맥 스텐트의 배치와 결합된 경피 관상 동맥 개입 (PCI)은 관상 동맥 질환의 중재 적 치료에 금 본위제입니다. 스텐트 내 레스테노스(ISR)는 스텐트 내의 신자극 조직의 과도한 증식에 의해 결정되며 스텐트의 장기적인 성공을 제한한다. 다양한 동물 모델이 스텐트 내 레스텐소증(ISR)의 기초병리학적 과정을 해명하는 데 사용되었으며, 돼지 관상 동맥 및 토끼 일강 동맥 모델이 가장 빈번하게 사용되고 있다. Murine 모델은 높은 처리량, 취급 및 하우징의 용이성, 재현성 및 분자 마커의 광범위한 가용성의 이점을 제공합니다. 아포포포프로틴 E결핍(apoE-/-) 마우스 모델은 심혈관 질환을 연구하는 데 널리 사용되고 있다. 그러나, 스텐트는 그들의 기계및 (잠재적으로) 생물학 속성의 중요한 변경을 관련시키는 마우스로 이식되기 위하여 소형화되어야 합니다. apoE-/--쥐의 사용은 apoE-/-쥐가 인간 크기의 관상 동맥 스텐트의 평가를 동시에 허용하는 동시에 아포로겐성 표현형을 제공하는 이러한 단점을 극복할 수 있다. 이것은 스텐트 이식 후 ISR을 조사하는 우수하고 신뢰할 수있는 모델입니다. 여기에서, 우리는, 상세히, 트랜스 대퇴접근을 사용하여 apoE-/- 배경을 가진 쥐의 복부 대동맥으로 상업적으로 이용 가능한 인간 관상 동맥 스텐트의 이식을 기술합니다.
서론
관상 동맥 스텐트의 배치와 결합된 경피 관상 동맥 개입(PCI)은 관상 동맥 질환1의중재 적 치료에 있는 금본위제(gold standard)를 나타낸다. 그러나 스텐트의 장기적인 성공은 스텐트2,3내의 신자극 조직의 과도한 증식에 의해 결정되는 스텐트 내 레스테노시스(ISR)의 발생에 의해 제한될 수 있다. ISR은 관상 동맥 우회 또는 재PCI로 재개입을 요구할 수 있습니다. ISR의 연구를 위해 다양한 동물 모델이 제안되었으며, 각각은 장점과 단점을 특징으로합니다. 가장 일반적으로 사용되는 돼지 관상 동맥 및 토끼 일강 동맥 모델의 주요 단점은 스텐트 이식후인간과 현저하게 유사한 병변을 개발하지만4,5,특히 장기 연구에서 물류 어려움을 초래하는 큰 동물 및 주거 비용뿐만 아니라 취급 및 장비의 한계입니다. 또한 돼지와 토끼의 세포 단백질에 대한 항체의 가용성은 제한적입니다. 한편, 뮤린 모델은 높은 처리량과 재현성의 주요 장점뿐만 아니라 취급, 하우징 및 비용 효율성의 용이성을 제공합니다. 더욱이, 항체의 더 많은 수를 사용할 수 있습니다....
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프로토콜
이 실험은 과학적 목적으로 사용되는 동물의 보호와 관련된 독일 동물 복지법(TSchG) 및 지침 2010/63/EU에 따라 수행되었습니다. 이 연구에 대한 공식 승인은 정부 동물 관리 및 사용위원회에 의해 부여되었다 (의정서 번호: AZ 87-51.04.2010.A065; 란데삼트 퓌르 나투르, 움웰트 und 베르브라우체슈츠 노르드하인-웨스트팔렌, 레클링하우젠, 독일). 연구 프로토콜은 실험실 동물의 치료 및 사용을위한 가이드를 준수. 수술 후 통증 치료는 실험실 동물 과학에 대한 독일 사회의 권고에 따라 (GV-SOLAS) 뿐만 아니라 이니셔티브 수의 통증 치료.
1. 기본 기술과 일반적인 절차
- 동형 어 아포를 사용-/- 스프라그-Dawley 쥐. 표준방법(17)을사용하여 각 동물의 유전자형을 식별한다.
- 동일한 조건(21°C ± 2°C, 습도 5% ± 60%, 12h 빛/암흑 주기)에서 동물을 유지하고 물과 음식에 대한 자유로운 접근을 보장합니다.
- 깨끗하지만 비살균 조건에서 모든 절차를 수행하십시오.
- 쥐가 마취되면, 16x의 배율에서 외과 현미경의 밑에 모든 절차를 수행하십시오.
- 압축 hem....
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결과
이 프로토콜은 트랜스 대퇴 접근 경로를 사용하여 쥐의 복부 대어타에서 스텐트 이식을 설명합니다(도1). 이 동물 모델의 첫 번째 핵심포인트는 인간 크기의 관상 동맥 스텐트를 배치할 수 있다는 것입니다. 상업적으로 이용 가능한 압착 및 풍선 장착 관상 동맥 스텐트는 쥐의 복부 대동맥에 배치 할 수 있습니다. 따라서, 또한, 인간과 동일한 스텐트 배치 원칙을 적용할 수 있다. 쥐의 사용의 또 다른 장점은 apoE-/-쥐와 같은 유전자 변형 균주의 가용성이며, 이는 상업적으로 사용할 수 있습니다.
우리는 최근에 야생형쥐(21)에비해 ISR을 개발하기 쉬운 아폴리포폴단백질 E-결핍쥐인지 평가하기 위해 이 방법을 사용하였다. 총 42마리의 수컷 쥐가 스텐트 이식을 받고 있으며, 28일 후 36마리의 쥐가 연구 프로토콜을 완료하였다(생존율 = 85.71%). 두 마리의 쥐는 .......
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토론
이 프로토콜은 apoE-/-쥐의 복부 대동맥에 인간 크기의 관상 동맥 스텐트의 이식을 설명합니다. 몇 가지 기술적 인 점은 강조 가치가있다. 첫째, 스텐트 크기와 대자의 크기 사이의 불일치는 피해야 합니다. 스텐트를 너무 작게 두면 스텐트 말라프포지션으로 이어질 수 있지만 대마에 비해 너무 큰 스텐트를 이식하면 혈관의 오버스트레치, 찢어짐 및 부상을 유발할 수 있습니다. 따라서 직경 2.0~2.5mm 사이의 스텐트를 사용하고 스텐트를 과도하게 늘려도 권장 범위 내에서 이식 압력을 유지하는 것이 좋습니다. 가장 적합한 이식 압력은 일반적으로 스텐트 제조업체에 의해 주어집니다. 대퇴 정맥과 그 후 베나 카바의 과도한 부상은 혈관 벽이 매우 얇고 매우 쉽게 부상을 입기 때문에 피해야하며, 출혈을 멈추기 어렵습니다. 대퇴동맥은 대퇴정맥과 맥동을 구별할 수 있으며, 이는 주의 깊게 관찰되어야 한다. 또 다른 함정은 가이드 와이어 및 / 또는 풍선 카테터를 도입 할 때 동맥 손상 및 해부의 가능성입니다. 동맥 해부는 풍.......
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공개 사항
저자는 공개 할 것이 없습니다.
감사의 글
안젤라 프룬드 부인에게 임베드 및 슬라이드 생산에 대한 귀중한 기술 적 지원에 감사드립니다. 우리는 또한 수의학 작업에 대한 그의 통찰력있는 도움에 대한 실험실 동물 과학 및 실험 수술 연구소에서 씨 Tadeusz Stopinski에게 감사드립니다.
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참고문헌
- Patel, M. R., et al.
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