설치류는 편두통 증상을보고 할 수 없습니다. 여기에서는 편두통 환자에서 가장 흔하고 귀찮은 증상 중 하나 인 가벼운 혐오감을 측정하기위한 관리 가능한 테스트 패러다임 (빛 / 어둠 및 개방 필드 분석)을 설명합니다.
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이 논문에서
요약
초록
편두통은 광공포증으로 관찰되는 빛에 대한 과민증과 같은 두통과 감각 이상을 특징으로하는 복잡한 신경 장애입니다. 마우스가 편두통을 겪고 있는지 확인하는 것은 불가능하지만 가벼운 혐오감은 광공포증의 편두통 증상에 대한 행동 대리자로 사용될 수 있습니다. 가벼운 혐오감을 테스트하기 위해, 우리는 밝은 / 어두운 분석을 사용하여 마우스가 밝거나 어두운 환경에서 자유롭게 보내는 시간을 측정합니다. 이 분석은 테스트 절차를 실행하기 전에 챔버에 사전 노출되고 조정 가능한 챔버 조명의 두 가지 중요한 수정을 도입하여 개선되었으며 55lux에서 27,000lux까지의 다양한 광도를 사용할 수 있습니다. 어둠 속에서 더 많은 시간을 보내는 선택은 불안을 나타내기 때문에, 우리는 또한 불안과 가벼운 혐오스러운 행동을 구별하기 위해 빛에 독립적 인 불안 테스트 인 오픈 필드 분석을 사용합니다. 여기에서는 밝은/어둡고 개방된 필드 분석에 대한 수정된 테스트 패러다임을 설명합니다. 이들 분석의 적용은 두 개의 마우스 균주에서 칼시토닌 유전자 관련 펩티드 (CGRP)의 복강내 주사 및 광유전학적 뇌 자극 연구를 위해 기술된다.
서론
편두통은 널리 퍼진 신경 질환으로 미국인의 약 17 %에 영향을 미치며1 전 세계적으로 장애의 두 번째 주요 원인입니다2,3. 환자는 메스꺼움 및 / 또는 구토, 또는 광공포증 및 음파 공포증4 중 적어도 하나의 증상과 함께 4-72 시간 지속되는 두통을 경험합니다. 현재 FDA가 승인한 칼시토닌 유전자 관련 펩타이드(CGRP) 항체 개발의 최근 발전은 편두통 치료의 새로운 시대를 열었습니다5,6,7. 이 항체는 CGRP 또는 그 수용체를 차단하고 편두통 환자의 약 50 %에서 편두통 증상을 예방합니다7. 지난 한 해 동안, CGRP 수용체의 두 개의 소분자 길항제는 편두통의 중단 치료를 위해 FDA 승인을 받았으며 두 개 이상의 파이프 라인에 있습니다8. 이러한 치료 진행에도 불구하고 편두통 발작이 발생하는 메커니즘은 여전히 애매합니다. 예를 들어, C....
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프로토콜
동물 절차는 아이오와 대학 동물 관리 및 사용위원회의 승인을 받았으며 국립 보건원 (National Institutes of Health)이 정한 표준을 준수하여 수행되었습니다.
1. 빛/어두운 분석
- 빛/어두운 챔버 장치( 재료 표 참조) 설정. 이 섹션의 모든 장비는 상업적으로 이용 가능합니다.
- 선반에 챔버와 어두운 인서트에 쉽게 접근할 수 있도록 풀아웃 서랍이 들어있는 소음 감쇠 칸막이(내부: W x H x D에서 59.7 x 38 x 35.6cm)를 놓습니다.
- DC 전원 공급 장치와 DC 레귤레이트 전원 공급 장치를 방음 큐비클에 연결합니다.
- 투명한 이음새가 없는 오픈 필드 챔버(27.31 x 27.31 x 20.32 cm in L x W x H)를 큐비클의 풀아웃 서랍에 놓습니다.
- 검정색, 적외선(IR) 투명 플라스틱 다크 인서트(28.7 X 15 X 20.6 cm in L x Wx H)를 오픈 필드 챔버에 놓습니다. 챔버가 같은 크기의 두 구역, 즉 어두운 영역과 밝은 영역으로 나뉘어져 있는지 확인하십시오.
- 오픈 필드 챔버의 X, Y 및 Z 축에 있는 세 세트의 16빔 IR 어레이를 케이블을 통....
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결과
이 행동 테스트 패러다임은 가벼운 혐오스러운 행동을 테스트하도록 설계되었습니다. 순진한 야생형 마우스와 광유전학 마우스 모두를 사용하여 표적 뉴런 집단의 자극 동안 실시간으로 빛 혐오감을 조사할 수 있다.
이 절차는 CD1 및 C57BL/6J 마우스10,16에서 말초 CGRP 치료의 효과와 C57BL/6J 마우스19의 후부 시상 핵에서 뉴런의 광학 자극이 빛-혐오스러운 행동에 미치는 영향을 연구하는 데 사용되었다. 10-20주령의 수컷 및 암컷 모두를 포함하는 마우스를 실험에 사용하였다(도 2A, 도 2B-D, 및 도 3). 그 결과, CGRP.......
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토론
빛/어둠 분석은 불안과 같은 행동을 평가하기 위해 널리 사용됩니다12. 이 분석은 빛에 대한 생쥐의 타고난 혐오감과 새로운 환경 (조명 영역)에 배치 될 때 탐구하려는 욕구에 의존합니다. 그러나 여기에서보고 한 바와 같이이 분석은 가벼운 혐오스러운 행동을 평가하는 데에도 사용할 수 있습니다.
테스트 전에 사전 노출의 수와 필요성을 고려하는 것이 중요합니다. 이것은 마우스 변형 또는 모델에 따라 다릅니다. 예를 들어, 우리의 빛/어두운 분석 프로토콜에서, 순진한 야생형 CD1 및 C57BL/6J 마우스는 치료 테스트 절차를 거치기 전에 두 번 빛/어두운 챔버에 사전 노출되는 반면, 광유전학적 마우스는 사전 노출을 겪지 않습니다. 최근의 한 간행물은 CD1 마우스가 i.p. CGRP 투여 후 가벼운 혐오감을 나타내기에 충분하다고 보고했다17. 결과적으로, 참신 파라미터의 중요성은 치료일
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공개 사항
저자는보고 할 이해 상충이 없습니다.
감사의 글
이 작업은 NIH NS R01 NS075599 및 RF1 NS113839의 보조금으로 지원되었습니다. 내용은 VA 또는 미국 정부의 견해를 대표하지 않습니다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 활동 모니터 | Med Assoc. Inc | 소프트웨어 추적 마우스 동작 | |
| 맞춤형 아크릴 선반 | LED 패널 높이 조정용 | ||
| 다크 박스 인서트 | Med Assoc. Inc | ENV-511 | |
| DC 전원 공급 장치 | Med Assoc. Inc | SG-500T | |
| DC 조절 전원 공급 장치 | Med Assoc. Inc | SG-506 | |
| 광섬유 캐뉼라 | Doric | MFC_200/ 240-0.22_4.5mm_ZF1.25_FLT | |
| 살균 일회용 물티슈 | Sani-Cloth | SKU # Q55172 | |
| 히트싱크 | Wakefield | 490-6K | LED 패널에 연결 |
| IR 컨트롤러 전원 케이블 | Med Assoc. Inc | SG-520USB-1 | |
| IR USB 컨트롤러 | Med Assoc. Inc | ENV-520USB | |
| 짝을 이루는 슬리브 | Doric | SLEEVE_ZR_1.25 | |
| 수정 LED 조명 패널 | Genaray Spectro | SP-E-360D | 일광 균형 색상 (5600K) |
| 전원 공급 장치 | MEAN WELL USA | SP-320-12 | LED 패널에 연결 |
| 원활한 개방 필드 챔버 | Med Assoc. Inc | ENV-510S | |
| 사운드 감쇠 큐비클 | Med Assoc. Inc | ENV-022MD-027 | |
| 스탠드 앤 클램프 | |||
| 3개의 16빔 IR 어레이 | Med Assoc. Inc | ENV-256 |
참고문헌
- Loder, S., Sheikh, H. U., Loder, E. The prevalence, burden, and treatment of severe, frequent, and migraine headaches in US minority populations: statistics from National Survey studies. Headache. 55 (2), 214-228 (2015).
- Collaborators, G. B. D. H.
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재인쇄 및 허가
