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방법 논문

혈역학적 특성화 및 관류 분석을 통한 만성 심근 허혈의 대형 동물 모델의 최종 수확 절차

503 조회수

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DOI:

10.3791/68545

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2025년 8월 22일

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1Department of Surgery, Division of Cardiothoracic Surgery, Warren Alpert Medical School, Brown University, 2Cardiovascular Research Center, Rhode Island Hospital

이 논문에서

요약

다음 수술 프로토콜은 새로운 치료법을 조사하기 위한 노력의 일환으로 돼지 모델에서 만성 심근 허혈을 성공적으로 유도한 후 심장 기능 및 심근 관류를 철저하고 안정적으로 특성화하기 위한 두 번째이자 마지막 절차를 나타냅니다.

초록

재현성과 연구 무결성은 과학적 발견의 기본 원칙이며, 잘 확립되고 입증된 원칙과 프로토콜을 활용하여 생산됩니다. 또한, 심혈관 질환(CVD)이 개인과 사회 전반에 미치는 유병률과 부담이 계속 증가함에 따라 조사를 위한 강력하고 검증된 모델을 개발하는 것이 필수적이라고 생각합니다. 우리 그룹은 지난 20년 동안 점진적으로 개선된 돼지 모델에서 두 가지 수술 프로토콜을 활용하며, 인간의 관상 동맥 질환(CAD)의 병태생리학을 모방한 아메로이드 수축기를 배치하여 만성 심근 허혈을 먼저 유도합니다. 두 번째이자 최종 절차는 심장 혈역학적 매개변수와 국소 관상동맥 관류의 포괄적이고 사려 깊은 수집이며, 그 다음에는 박동 심장 안락사 및 심장의 상세한 절편이 뒤따릅니다. 우리 연구실은 실험적 치료제로 인한 담보화를 정량화하는 강력한 방법으로 동위원소 표지 마이크로스피어를 사용하여 허혈 부위로의 심근 혈류를 분석합니다. 또한, 아마도 가장 중요한 측정 가능한 심혈관 결과인 좌심실 압력-용적(PV) 루프 카테터 삽입을 활용하여 광범위한 혈역학적 매개변수를 측정합니다. 우리는 만성 심근 허혈의 돼지 모델에 대한 포괄적인 심장 분석을 자세히 설명함으로써 다른 연구자들이 심혈관 질환 제거를 위한 자체 프로토콜 및 치료 조사를 개선하고 발전시킬 수 있기를 바랍니다.

서론

미국에서는 거의 절반의 개인이 심장과 혈관의 대규모 질병 상태 그룹을 구성하는 CVD의 구성 요소를 하나 이상 가지고 있습니다1. 2060년까지 CVD를 포함하는 다중 진단의 유병률은 2025년에 비해 크게 증가할 것으로 예상됩니다. 예를 들어, 심근경색은 30%, 허혈성 심장 질환(IHD)은 31.3%, 심부전은 33% 증가할 것으로 예상됩니다2. 이러한 놀라운 통계는 당뇨병 환자의 수가 39.3%, 이상지질혈증이 27.5%, 고혈압이 27.2% 증가할 것으로 추정되는 심혈관 위험 요인에 대한 유사한 예측과 함께 고려할 때 더욱 우려스럽습니다2. 전체적으로 이는 CVD에 대한 혁신적인 치료법과 그 위험 요인을 효과적으로 조사하기 위해 신뢰할 수 있고 재현 가능한 연구 모델의 필요성이 임박했음을 강조합니다. 우리는 돼지3에서 CAD의 생리학적으로 유사한 모델을 시연했습니다. 돼지를 사용하면 이전에 전임상 연구에서 번역 가능성에 대해 비판을 받았던 CAD의 인간 상태를 정확하게 표현하는 연구 모델의 타당성을 충족하는 데 도움이 됩니다. 돼지는 인간과 유사한 관상 동맥 해부학, 심장 생리학, 심근 프로테옴 및 신진대사를 가지고 있습니다4. 또한, 우리 모델의 중요한 구성 요소는 연구 요법으로 인한 후속 생리학적, 심근 및 분자적 결과를 정확하게 설명하는 것입니다.

일반적으로 임상 시험은 관찰을 통해서만 발견되는 유익한 심혈관 결과를 조사하기 위해 새로운 의료 또는 외과적 치료법을 구현하는 데 사용됩니다. 이는 심혈관에 미치는 영향을 조사하는 여러 새로운 항당뇨병 약물의 획기적인 시험에서 분명하게 드러납니다. 예를 들어, SUSTAIN-6 무작위 대조 시험에서 글루카곤 유사 펩타이드-1(GLP-1) 작용제인 세마글루타이드로 치료받은 제2형 당뇨병 환자는 위약에 비해 주요 심혈관 부작용 발생률이 낮은 것으로 나타났습니다5. 이중 나트륨-포도당 공동수송체 1 및 2(SGLT-1 및 SGLT-2) 억제제인 소타글리플로진을 연구한 또 다른 RCT에서도 유사한 관찰이 관찰되었으며, 제2형 당뇨병, 만성 신장 질환 및 추가 심혈관위험 인자 6. 이러한 발견은 심혈관 위험 요인 및 질병의 발생률을 줄이기 위해 이러한 치료법에 대한 FDA 승인을 확대하는 데 결정적이었습니다. 그러나 이러한 관찰 결과의 주요 한계는 이러한 새로운 치료법이 그러한 효과를 영속시키는 메커니즘에 대한 이해가 부족하다는 것입니다. 이는 CVD에 대한 새로운 치료법에 대한 근본적인 메커니즘 결정 요인의 과학적 발견에서 우리 모델의 중요성을 보여줍니다.

대형 동물 모델을 사용하여 심장 기능과 심근 관류의 거시적 변화를 침습적으로 특성화할 수 있을 뿐만 아니라 실험적 치료에 대한 반응으로 미세한 분자 변화를 포괄적으로 이해할 수 있습니다. 우리는 심장 기능의 변화를 결정하기 위해 PV 루프 카테터 삽입을 사용합니다. PV 루프의 사용은 수축기 및 이완기 동안 심실 기능을 침습적으로 결정하기 위한 황금 표준이며 심초음파 또는 심장 MRI와 같은 비침습적 영상 기술을 비교하기 위한 벤치마크 역할을 합니다7. 이 기술을 사용하면 여러 측정을 수행하여 각 혈역학적 변수를 결정하고 카테터의 위치를 실시간으로 변경하여 재현 가능한 데이터 수집을 보장할 수 있습니다. 즉, 이 기술의 활용은 기준선 심장 기능, 허혈 발병 시 심장 기능 및 치료 중 심장 기능과 같은 종단 데이터를 수집할 수 없다는 점에서 제한됩니다. 우리는 이것이 부하 독립적인 측정을 측정하여 심장의 본질적인 기능 상태를 얻을 수 있는 능력으로 상쇄된다고 생각합니다. 또한, 가장 허혈성 영역을 매핑한 후 동위원소 표지 마이크로스피어 주사를 사용하면 치료제의 허혈적 이점을 식별하는 데 도움이 됩니다. 마이크로스피어 주사는 국소 심근 혈류의 변화를 정확하게 나타내는 것으로 오랫동안 입증되었습니다8.

우리 연구실은 직경 15μm, 농도 250만 마이크로스피어/mL의 마이크로스피어를 일관되게 사용합니다. 이 직경은 미세구가 혈류에 따라 적절하게 분포되고 더 작은 직경이 좌심실층 간 분포의 변동이 가장 적다는 것을 보여주는 이전 연구에서 확인된 바와 같이 심근 혈류의 가장 정확한 측정을 보장합니다9. 또한 신뢰할 수 있는 결과를 보장하기 위해서는 최소한의 마이크로스피어 흡수가 필요하며, 이는 우리 실험실에서 사용되는 고농도로 쉽게 생산됩니다. 종합하면, 최종 수확 중에 사용된 기술은 여러 실험적 치료 후 주요 심장 생리학적 변화를 일관되고 꼼꼼하게 분석합니다. 이러한 특성화는 심근 조직을 수집하고 멀티오믹 연구와 같은 첨단 기술로 지역적 변화를 철저히 분석하여 심근 내 중심 도그마의 각 층에서 강력하고 정량적인 특성화를 제공하는 능력으로 더욱 강화됩니다.

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프로토콜

다음 수술 절차는 로드 아일랜드 병원과 브라운 대학의 기관 동물 관리 및 사용 위원회의 승인을 받았습니다(프로토콜 #23-08-0005).

1. 동물 모델

  1. 이전에 근위 좌회선 관상동맥(LCx) 주위에 아메로이드 수축기를 배치하여 만성 심근 허혈을 유발하고 후속 실험적 치료제로 치료한 요크셔 돼지를 선택합니다. 아메로이드 배치를 위한 첫 번째 작업과 후속 말단 수확 사이에 ~7주를 유지하십시오. 아메로이드 폐쇄를 위해 2주를 허용하고 그 후 돼지가 실험적 치료를 받도록 합니다. 돼지가 이 최종 수확 시점에 생후 ~18주이고 체중이 ~40kg이고 실험군과 대조군이 성별에 따라 일치하는지 확인하십시오.
    참고: 대표적인 그림은 아메로이드가 이전에 배치된 위치와 허혈성 심근의 예상 영역을 포함하는 우리가 수확하는 심장의 해부학적 구조를 보여줍니다(그림 1).

2. 수술 전 절차

  1. 시술 당일 아침에는 음식을 섭취하지 마십시오.
  2. 텔라졸(4.4mg/kg)과 자일라진(2.2mg/kg)의 근육 주사를 사용하여 돼지를 마취하고 커프가 있는 기관내관으로 삽관합니다.
  3. 0.03mg/kg의 부프레노르핀을 사용하여 진통을 시작합니다.
  4. 큰 귓바퀴 정맥 중 하나에 정맥(IV) 카테터(20-22G)를 삽입하고 ~5-10cc∙kg-1∙h-1의 속도로 0.9% 식염수 주입을 시작합니다.
    참고: IV 수액은 돼지의 NPO 상태와 수술 케이스의 길이에 따라 유지 비율에만 있습니다.
  5. ECG 모니터링에 사용되는 수술 부위 및 기타 부위를 면도합니다.
  6. 돼지를 수술실 테이블로 옮기고 다리를 테이블에 묶은 채 바로 누운 자세로 이소플루란(0.75-3.0%)을 사용하여 마취를 계속합니다.
  7. ECG 및 혈압 모니터링을 시작하고 돼지에게 전기 소작 접지 패드를 적용합니다.
  8. 수술 부위를 정화하십시오.
    알림: 이것은 최종 절차입니다. 따라서 무균 상태를 유지할 필요가 없습니다. 수술 부위 준비 및 드레이핑에 대한 개인의 선호도입니다.

3. 수술 절차

  1. 대퇴 카테터 삽입
    1. 대퇴골 맥박을 촉진합니다.
    2. 사타구니 주름에 대략 수직으로 왼쪽 또는 오른쪽 사타구니가 절단되어 두개꼬리로 움직일 수 있도록 2% 리도카인을 피하 주사합니다.
    3. #10 메스를 사용하여 4-5cm 절개를 하고 다시 사타구니 주름에 수직을 유지하여 대퇴 맥박이 촉진된 곳에서 꼬리쪽으로 시작하여 두개골로 움직입니다. (그림 2A)
    4. 전기 소작을 사용하여 피하 조직을 대퇴 동맥 수준까지 해부합니다. Weitlaner 견인기를 사용하여 근육을 확장하여 대퇴 동맥을 더 노출시킵니다.
      참고: 이것은 반막근과 내측광근을 소량의 분할이 필요할 수 있습니다.
    5. 직각 클램프를 사용하여 대퇴 동맥을 주변 조직에서 원주 방향으로 노출시키기 위해 무뚝뚝하게 해부합니다. Metzenbaum 가위를 사용하여 뭉툭하게 제거할 수 없는 접착 부분을 날카롭게 나눕니다.
    6. 혈관 루프로 동맥을 둘러싸서 대퇴 동맥을 분리합니다.
    7. 동맥의 근위 및 원위 제어를 보장하기 위해 두 번째 혈관 루프를 배치합니다.
    8. 캐뉼라 삽입 전에 80 IU/kg의 용량으로 돼지를 전신적으로 헤파린화합니다.
      참고: 헤파린화하고 대퇴골 접근을 달성하기 전에 정중 흉골 절개술과 심장 노출이 완료되었는지 확인하십시오. 유착의 용해가 출혈을 일으킬 수 있기 때문에 헤파린화 전에 심장 노출이 완료되었는지 확인합니다. 헤파린화의 전반적인 목적은 대퇴 동맥과 좌심실 모두에 접근할 때 혈전 예방을 위한 것입니다.
    9. Seldinger 기술을 사용하여 18G 접근 바늘로 대퇴 동맥에 구멍을 뚫고 후동맥벽을 뚫지 않도록 합니다. 혈액이 돌아오면 가이드와이어를 바늘을 통해 동맥으로 전진시킵니다. 바늘을 제거하고 7F 동맥초를 동맥으로 안내합니다. 가이드와이어와 혈관 확장기를 제거하고 동맥초만 제자리에 둡니다.
      참고: 대퇴 동맥은 쉽게 해부할 수 있기 때문에 접근하기 어려울 수 있습니다. 말기 시술이기 때문에 Metzenbaum 가위로 대퇴 동맥을 날카롭게 절단하고 이 경우 가이드와이어를 내강에 직접 삽입하는 것이 좋습니다. 그런 다음 동맥초는 가이드와이어를 통해 혈관으로 쉽게 통과할 수 있습니다. 작은 지혈제를 사용하여 대퇴 동맥의 원위 부분을 고정하십시오.
    10. 칼집을 통한 혈류를 보장합니다. Harvard Apparatus 인출 펌프에 연결합니다(그림 3).
  2. 정중 흉골 절개술
    1. 공동 외과 의사의 수에 따라 이 부분은 사타구니 절단과 동시에 완료될 수 있습니다.
    2. 정중선 흉골 절개술을 준비하기 위해 2% 리도카인을 피하 주사합니다.
    3. #10 메스를 사용하여 흉골 노치에서 검상돌기까지 정중선 절개를 합니다. (그림 2B)
    4. 전기 소작을 사용하여 흉골에 도달할 때까지 피하 조직을 분할하고 지혈을 유지합니다.
    5. 전기 소작술로 측면 및 하부로 유착을 제거하여 검상돌기를 절제합니다. 켈리 클램프를 사용하여 검상돌기를 들어 올리고 전기 소작을 사용하여 기저부를 수평으로 횡단합니다.
    6. 흉골의 이 부분을 쉽게 분할할 수 있도록 흉골 노치가 위쪽으로 자유롭게 해부되었는지 확인하십시오. 이것은 일반적으로 일부 표면 스트랩 근육을 분할해야 합니다.
    7. 손가락을 사용하여 흉골 아래를 무뚝뚝하게 해부합니다.
    8. Lebsche 칼을 사용하여 흉골을 날카롭게 나누어 정중선을 유지하도록 합니다. 필요에 따라 칼의 각도를 변경하고 흉골의 후반 1/3에 도달하면 천천히 계속하십시오.
      참고: 흉골 두개골 부분의 가파른 각도와 두께로 인해 인간과 같이 흉골 톱보다 칼을 사용하는 것이 선호되며, 이상적으로는 밑에 있는 큰 혈관의 손상 위험을 줄일 수 있습니다. 밑에 있는 큰 혈관을 보호하기 위해 흉골의 두개골 부분 아래에 거즈를 놓는 것이 유용할 수 있습니다.
    9. 흉골 절개술이 완료되면 흉벽과 심낭 또는 흉막 사이에 유착이 있는 경우 뭉툭하고 날카롭게 용해합니다.
    10. 흉골 견인기를 배치하여 갈비뼈를 벌리고 심장을 노출시킵니다.
    11. Metzenbaum 가위를 사용하여 심낭을 엽니다. 우심방을 향해 확장하고 좌심실 정점을 향해 꼬리쪽으로 계속합니다.
    12. 유착을 계속 뭉툭하게 또는 날카롭게 용해하여 왼쪽 및 오른쪽 심방이가 노출됩니다. Allis 클램프에 땅콩 스펀지를 사용하면 이 해부에 도움이 될 수 있습니다.
    13. 심방이들을 해부하고 식별하기 어려운 경우 흉선 절제술이 도움이 될 수 있습니다. 이를 수행하려면 전기 소작술을 사용하여 흉선 조직을 해부하십시오.
    14. 심방이가 노출되면 단일 챔버 외부 페이싱 박스에 연결된 양쪽 부속기에 페이싱 클램프를 적용합니다. 150bpm까지 속도 조절을 테스트하여 각 박동이 ECG에 캡처되는지 확인합니다.
    15. 다시 뭉툭하고 날카로운 해부를 사용하여 좌심실 정점의 노출을 보장합니다.
    16. 마지막으로 왼쪽 흉막강으로 들어가 큰 Satinsky 클램프로 하대정맥(IVC)을 둘러쌉니다. 용기 루프로 분리합니다.
    17. 이것이 완료되면 돼지를 헤파린화하고 대퇴골 접근을 얻을 수 있는 적절한 시기입니다.
  3. 마이크로스피어 주입-관류 분석
    1. IV 튜브에 부착된 미세 게이지 버터플라이 바늘과 3방향 마개를 사용하여 좌심방이에 접근합니다. 작은 지혈제를 사용하여 바늘을 안내하고 제자리에 고정합니다.
    2. 멸균 헤파린 처리 식염수로 주사기를 마개에 연결하고 올바른 위치를 보장하기 위해 다시 빼냅니다. 혈액이 쉽게 빠져나오면 위치가 맞습니다.
    3. 5mL의 루테튬 표지 마이크로스피어(농도: 250만 마이크로스피어/mL)가 들어 있는 주사기를 3방향 마개에 연결합니다.
    4. 수술실 보조원에게 90초 시간을 할당합니다.
    5. Harvard Apparatus 펌프를 통해 6.67mL/min의 속도로 총 10mL의 혈액에 대해 대퇴 동맥 혈액 채취를 시작하고 타이밍을 시작합니다.
    6. 채혈의 처음 30초 동안 루테튬 마이크로스피어를 좌심방이에 주입합니다(그림 4). 중간에 마이크로스피어가 들어 있는 주사기를 빼서 위치를 확인합니다.
    7. 이 작업이 완료되면 헤파린 처리 식염수 주사기로 튜브를 세척하고 올바른 위치를 다시 확인하십시오.
    8. 90초 후 대퇴골 접근에서 인출 펌프에 대한 튜브를 분리하고 새 튜브를 다시 연결하여 페이싱 중에 분석을 얻습니다.
    9. 150bpm까지 속도를 시작합니다.
    10. 5mL의 사마륨 표지 마이크로스피어(농도: 2.5 × 106 마이크로스피어/mL)를 사용하여 3.3.5, 3.3.6 및 3.3.7단계를 반복합니다.
    11. 페이싱을 멈추고 Harvard Apparatus 인출 펌프에서 대퇴 동맥초를 분리합니다.
    12. 나비 바늘을 제거하고 압력을 가하여 좌심방이의 지혈을 보장합니다.
  4. 압력-용적 루프 카테터 삽입
    1. 4-0 폴리프로필렌으로 좌심실 정점에 지갑 끈 봉합사를 배치합니다.
    2. 봉합사로 둘러싸인 영역의 중앙에서 위에서 설명한 Seldinger 기술을 사용하여 좌심실에 다른 동맥초에 접근하여 배치합니다.
    3. 보정된 마이크로압력계 팁의 압력-용적 형질 전달 카테터를 덮개를 통해 좌심실에 삽입합니다. 카테터 위의 좌심실에서 동맥초를 당겨 빼내고 압력-용적 측정 시스템을 사용하여 압력 파형을 변환하기 시작합니다. 이것은 예를 들어 카테터가 대동맥, 판막 복합체 또는 좌심실에 있는 경우와 같이 카테터의 위치를 알려줍니다. 필요에 따라 카테터를 다시 당겨 좌심실강에 있는지 확인하고 압력-용적 루프 형태가 적절하게 나타나도록 위치를 변경합니다(그림 5).
      참고: 좌심실에서 칼집을 제거하면 카테터에서 압력-용적 추적을 더 잘 전달할 수 있으며 각 PV 루프의 가장 적절한 형태를 얻기 위해 카테터의 위치를 더 쉽게 변경할 수 있습니다.
    4. 수축기 및 이완기 혈압과 평균 동맥압을 얻기 위해 대퇴골 접근에 다른 보정된 PV 카테터를 배치합니다.
    5. PV 루프의 형태에 만족하면 휴식 시 세 번의 숨 참기를 수행하여 압력-용적 루프의 호흡 변화를 줄입니다. 이것은 심박출량 및 박출량과 같은 여러 부하 종속 변수를 측정합니다.
    6. 그런 다음 혈관 루프를 부드럽게 후퇴시켜 IVC를 폐색하고 동시에 숨을 참아 수축기말 압력 용적 관계(ESPVR) 및 이완기말 압력 용적 관계(EDPVR)와 같은 부하 독립적 변수를 얻습니다. 두 번 더 반복합니다.
    7. 150bpm까지 페이싱을 시작하고 스트레스 조건에서 심장 성능을 특성화하기 위해 세 번의 숨 참기를 얻습니다.
    8. 이것으로 심장 기능의 프로파일링이 완료됩니다. 양쪽 카테터를 제거하고 지갑 끈 봉합사를 좌심실에 묶습니다.
  5. 안락사를 이기다
    1. 가슴에서 페이싱 리드와 모든 기구를 제거합니다.
    2. 부외과 의사를 위한 흡입을 얻으십시오.
    3. 흉벽에 대한 심장의 측면 유착을 무뚝뚝하게 해부하고 좌심실 정점을 쉽게 위쪽으로 들어 올릴 수 있는지 확인합니다.
    4. 진정을 심화시키기 위해 마취를 요청하십시오.
    5. 쉽게 접근할 수 있는 경우 상대정맥(SVC)에 큰 Kelley 클램프를 놓고 IVC 주위에 큰 Satinsky 클램프를 놓습니다. 클램프 동시에.
    6. 즉시 #10 메스를 사용하여 가슴에서 심장을 제거하십시오. 여기에는 IVC, SVC, 대동맥, 폐동맥 및 폐정맥에서 심장을 분리하는 것이 포함됩니다.
      참고: 이 시간 동안 공동 외과 의사는 수술 부위를 가능한 한 깨끗하게 유지하기 위해 흡입을 제공해야 합니다.
    7. 가슴에서 하트를 전달하여 별도의 테이블에 놓습니다.
    8. 정점과 기저부의 두 반으로 자릅니다(그림 6A). 이것은 심실 조직을 심방 및 대혈관에서 분리합니다.
    9. 좌심실을 다른 모든 심근 조직과 분리합니다.
    10. 각 절반은 그림 6B에 표시된 대로 좌전하행관상동맥(LAD) 및 후하행관상동맥과의 근접성을 기준으로 원주 방향으로 12개의 섹션으로 분할되어야 합니다.
    11. 다른 모든 챔버, 판막, 대혈관 및 말초 조직(예: 췌장, 간, 폐, 신장 등)에서 조직 샘플을 수집합니다.
    12. 각 좌심실 절편의 작은 샘플은 마이크로스피어 정량화를 위해 BioPAL에 할당되어야 합니다. 특정 절편은 조직학적 분석을 위해 포르말린에 고정되는 반면, 대부분의 조직은 향후 분자 연구를 위해 액체 질소에서 급속 냉동됩니다.

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결과

먼저, 동위원소 표지 마이크로스피어를 좌심방이에 주입하여 국소 심근 관류를 측정합니다. 심근 혈류를 계산하기 위해 6.67 mL/min의 일정한 채혈 속도를 활용했을 때 다음 방정식을 적용할 수 있습니다: 심근 혈류 = (기준 채혈[6.67 mL/min]/조직 무게) (정량화된 조직 마이크로스피어 수/정량화된 혈액 참조 마이크로스피어 수). 간단히 말해서, 특정 심근 절편에서 측정된 마이크로스피어와 특정 속도로 수집되었을 때 혈액에서 정량화된 마이크로스피어의 비율은 해당 심근 섹션으로의 후속 혈류 속도를 도출합니다. 마이크로스피어의 양은 조직과 혈액이 건조되면 BioPAL에 의해 계산됩니다. 루테튬은 안정시 심박수에 사용되며 사마륨은 페이싱에 사용됩니다. 이전 연구에서 7주 동안 발달한 측부 맥관 구조가 휴식 시 혈류를 회복하기에 충분할 수 있다는 사실이 밝혀졌기 때문에 심장 조율을 조절할 때 사마륨을 사용하는 것은 프로토콜에서 매우 중요합니다. 그러나 스트레스를 받을 ...

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토론

이 수술 절차에는 심장 노출, 대퇴 카테터 삽입, 관류 분석을 위한 마이크로스피어 주입 및 압력-용적 루프 획득의 네 가지 중요한 단계가 있습니다. 심장 노출과 관련하여 중요한 고려 사항은 첫 번째 수술로 인해 심각한 유착이 발생할 가능성입니다. 정중 흉골 절개술을 시행할 때 심낭이 흉벽에 부착될 수 있으며, 흉골 절개술을 시작하기 전에 흉벽을 뭉툭하게 쓸어내야 합니다. 흉골의 후반부의 1/3에 접근하면 흉골이 상당히 두꺼워지고 급격히 아래쪽으로 기울어집니다. 흉골의 이 부분 아래에 거즈를 놓아 Lebsche 칼과 밑에 있는 대혈관 및 무명 정맥 사이를 더 많이 분리하는 것이 도움이 될 수 있습니다. 공정 중에 무명 정맥이 전단되면 먼저 압력과 흡입을 가하여 필드를 청소하십시오. 손상이 확인되면 폴리프로필렌 봉합사로 측벽을 수리하거나 실크 봉합사로 혈관을 결찰할 수 있습니다. 또한 심방이와 좌심실 정점을 모두 노출시키는 것이 어려울 수 있습니다. 일반적으로 Metzen...

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공개 사항

저자는 공개나 이해 상충이 없습니다.

감사의 글

연구 자금은 국립 보건원(National Institutes of Health)에서 제공했으며 T32HL16051703(K.C.M., C.S., D.D.H, M.K.), R01HL46716(F.W.S) 및 R01HL128831(FWS)의 보조금 번호를 포함합니다. 로드아일랜드 병원과 브라운 대학교의 수의사 직원들에게 인도적인 동물 보살핌과 다양한 프로젝트에 대한 탁월한 지원에 깊은 감사를 표하고 싶습니다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
#10 메스메드라인MDS15310
0.9% 식염수데크라/베티벡스17033-492-50속도: 케이스 중 5-10mL/kg
18G 바늘패터슨 수의학78032793약물/마이크로스피어 그리기용
2% 리도카인불사조57319-533-05복용량: 2-5mg/kg
4-0 폴리프로필렌 봉합사코비디엔D9H0436Y지갑 끈용
모든 수술 기구스테리스와 메드라인영업 담당자 필요모두 병원 수술실에서 흔히 볼 수 있습니다.
진통제: 부프레노르핀호스피라브랜드 이름: 부프레딘투여량: 0.03mg/kg
마취: 텔라졸조에티스(틸레타민과 졸라제팜)투여량: 4.4mg/kg
마취: 자일라진(롬푼)데크라해당 사항 없음투여량: 2.2mg/kg
동맥초코디스401-711엠6층 또는 7층; 두 개의 요구 사항
나비 바늘 주입 세트서플로SV-25BLK마이크로스피어 주입용; 일반적으로 23-25G
클로르헥시딘 4%BD EZ 스크럽371073원하는 경우 수술 준비
커프가 있는 기관내관러쉬일반적으로 7-0돼지 크기와 체중에 따라 다른 크기가 필요할 수 있습니다.
ECG 모니터링 시스템미드마크해당 사항 없음다중 매개변수 모니터
전기 소작보비 스페셜리스트 프로1250초가능하면 일반적으로 2개를 설정합니다.
이소플루란, USP데크라투여: 0.75%-3.0%
랩톱HP 마이크로소프트해당 사항 없음개인이 선호하는 모든 노트북을 사용할 수 있습니다.
렙쉐 나이프인테그라300-425해당 사항 없음
루테튬 STERIspheres바이오팔, Inc.C-15E20양: 수술당 5cc
미니 백색 혈관 루프(X선 감지 가능)디로얄30-711대퇴 동맥과 IVC를 분리하기 위해
여러 개의 5cc 주사기테루모SS-05L플러시 및 마이크로스피어 주입용
맥 박 조정기오시프카 메디컬2428001임시 페이서
PV 루프 카테터트랜스포닉모델: FDH-5018B-E3450 및 S/N: 50-679PV 루프 획득용
PV 루프 컴퓨터 프로그램초음속 사이센스ADV500 소프트웨어노트북에서 프로그래밍
PV 루프 데이터 수집 시스템트랜스포닉 및 AD구조모델: FY097B 및 PowerLab 8/35카테터와 컴퓨터를 연결합니다.
사마륨 스테리스피어바이오팔, Inc.C-15A20양: 수술당 5cc
작은 망치인테그라410-335해당 사항 없음
멸균 장갑앙코르820955여전히 멸균 장갑과 가운을 권장합니다.
멸균 식염수백스터G171328희석하여 헤파라닌화 식염수 플러시를 만듭니다.
흡입 시스템곰코4042자체 시설의 벽 흡입이 더 좋습니다.
흡입 팁: Yankauer메드라인DYND50130심장을 절제할 때 필드를 깨끗하게 유지하는 것이 중요합니다.
전신 헤파린코베트러스82496복용량: 80 IU/kg
3방향 마개쇠요르겐슨 연구소, Inc.200820마이크로스피어 주입용
온수 목욕어부사용하기 전에 카테터를 따뜻하게 하려면
인출 펌프하버드 장치70-2002말초혈액을 일정한 속도로 채취하기 위해
요크셔 돼지CBSET, Inc.해당 사항 없음돼지는 이미 초기 수술을 받았을 것입니다

참고문헌

  1. Tsao, C. W., et al. Heart disease and stroke statistics-2022 update: a report from the American Heart Association. Circulation. 145 (8), e153-e639 (2022).
  2. Mohebi, R., et al. Cardiovascular disease projections in the United States based on the 2020 census estimates. J Am Coll Cardiol. 80 (6), 565-578 (2022).
  3. Stone, C. R., et al. Crafting a rigorous, clinically relevant large animal model of chronic myocardial ischemia: what have we learned in 20 years. Methods Protoc. 7 (1), 17(2024).
  4. Jia, H., Chang, Y., Song, J. The pig as an optimal animal model for cardiovascular research. Lab Anim (NY). 53 (6), 136-147 (2024).
  5. Marso, S. P., et al. Semaglutide and cardiovascular outcomes in patients with type 2 diabetes. N Engl J Med. 375 (19), 1834-1844 (2016).
  6. Aggarwal, R., et al. Effect of sotagliflozin on major adverse cardiovascular events: a prespecified secondary analysis of the SCORED randomised trial. Lancet Diabetes Endocrinol. 13 (4), 321-332 (2025).
  7. Stonko, D. P., et al. A technical and data analytic approach to pressure-volume loops over numerous cardiac cycles. JVS Vasc Sci. 3, 73-84 (2022).
  8. Cannon, P. J. Radioisotopic studies of the regional myocardial circulation. Circulation. 51 (6), 955-963 (1975).
  9. Domenech, R. J., et al. Total and regional coronary blood flow measured by radioactive microspheres in conscious and anesthetized dogs. Circ Res. 25 (5), 581-596 (1969).
  10. Roth, D. M., et al. Development of coronary collateral circulation in left circumflex Ameroid-occluded swine myocardium. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 253 (5 Pt 2), H1279-H1288 (1987).
  11. Elmadhun, N. Y., Sadek, A. A., Sabe, A. A., Lassaletta, A. D., Sellke, F. W. Alcohol and the heart: a proteomics analysis of pericardium and myocardium in a swine model of myocardial ischemia. Ann Thorac Surg. 100 (5), discussion 1635 1627-1635 (2015).
  12. Harris, D. D., et al. Proteomic analysis and sex-specific changes in chronically ischemic swine myocardium treated with sodium-glucose cotransporter-2 inhibitor canagliflozin. J Am Coll Surg. 238 (6), 1045-1055 (2024).
  13. Harris, D. D., et al. Proteomic profiling of SGLT-2 inhibitor canagliflozin in a swine model of chronic myocardial ischemia. Biomedicines. 12 (3), 558(2024).
  14. Sabe, A. A., et al. Investigating the effects of resveratrol on chronically ischemic myocardium in a swine model of metabolic syndrome: a proteomics analysis. J Med Food. 18 (1), 60-66 (2015).
  15. Sabe, S. A., et al. Effects of canagliflozin on myocardial microvascular density, oxidative stress, and proteomic profile. J Mol Cell Cardiol Plus. 6, 100052(2023).
  16. Xu, C. M., et al. Proteomic assessment of hypoxia-pre-conditioned human bone marrow mesenchymal stem cell-derived extracellular vesicles demonstrates promise in the treatment of cardiovascular disease. Int J Mol Sci. 24 (2), 1674(2023).
  17. Billig, S., et al. Transesophageal echocardiography in swine: evaluation of left and right ventricular structure, function and myocardial work. Int J Cardiovasc Imaging. 37 (3), 835-846 (2021).
  18. Hocum Stone, L. L., et al. Magnetic resonance imaging assessment of cardiac function in a swine model of hibernating myocardium 3 months following bypass surgery. J Thorac Cardiovasc Surg. 153 (3), 582-590 (2017).

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