JoVE 실험 백과사전
신경과학
0 조회수 • 1:21 분 • March 4th, 2025
경증의 만성 뇌 저관류(MCCH)를 투여하고 아밀로이드-베타 펩타이드를 주사한 쥐의 뇌 조직 절편을 채취합니다.
MCCH는 뇌로 가는 혈류가 감소하는 것이 특징입니다. 이는 뇌혈관의 내피 세포층으로의 산소와 영양분 공급을 제한하여 세포를 손상시킵니다.
손상은 혈관 벽 투과성을 증가시켜 주입된 아밀로이드-베타 펩타이드가 벽에 축적되어 플라크를 형성할 수 있도록 합니다.
잔류 화학 물질을 제거하기 위해 버퍼로 섹션을 세척하십시오.
아밀로이드 플라크에 결합하는 형광 염료인 티오플라빈 S로 배양합니다.
감소하는 알코올 농도로 얼룩진 부분을 세척하여 결합되지 않은 염료를 제거하고 조직에 수분을 보충합니다.
수분을 유지하기 위해 섹션을 버퍼에 넣으십시오.
염료의 형광 강도를 보존하는 장착 매체를 사용하여 섹션을 장착합니다.
형광 현미경에서 형광 표지된 아밀로이드 침전물의 존재를 검사하여 MCCH 유도 아밀로이드-베타 응집을 확인합니다.