0 조회수 • 1:22 분 • March 4th, 2025
신경 퇴행성 질환의 원인이 되는 정상 프리온 단백질과 잘못 접힌 프리온 응집체를 모두 포함하는 포유류 뇌에서 균질화된 조직을 취하십시오.
단백질 분해 효소로 배양하여 정상적인 프리온을 소화하고 저항성 응집체는 그대로 둡니다.
고온에서 변성 완충액으로 응집체를 처리하여 단백질을 선형화하고 균일한 음전하를 부여합니다.
샘플을 전기영동 겔에 로드하고 단백질을 밴드로 분리하여 응집체의 존재를 확인합니다.
전기장을 사용하여 분리된 단백질을 멤브레인으로 전달합니다.
비특이적 결합 부위를 마스킹하기 위해 차단 용액으로 멤브레인을 배양합니다.
peroxidase 효소 표지 항체로 배양하여 프리온 응집체에 특이적으로 결합합니다.
멤브레인을 세척하여 결합되지 않은 항체를 제거하고 비특이적 신호를 최소화합니다.
화학발광 기질과 산화제를 첨가하여 과산화효소가 기질을 산화시키고 빛을 생성할 수 있도록 합니다.
광도를 측정하여 균질화에서 잘못 접힌 프리온을 정량화합니다.