알츠하이머병의 아밀로이드 플라크에서 헤파란 설페이트의 면역형광 염색

글리코사미노글리칸(glycosaminoglycan)인 헤파란 설페이트(Heparan sulfate)는 알츠하이머병과 관련된 아밀로이드 플라크(amyloid plaque)에 존재합니다.

헤파란 설페이트를 시각화하려면 아밀로이드 플라크를 포함하는 병든 인간 해마 조직 절편부터 시작합니다.

세포 구조를 보존하기 위해 고정제를 사용하여 조직 단면을 고정합니다.

다음으로, 비특이적 항체 결합을 방지하기 위해 조직을 차단제로 처리합니다.

비이온성 세제를 첨가하여 세포막을 투과시킵니다.

아밀로이드 플라크 내의 헤파란 황산염을 특이적으로 표적으로 하는 1차 항체로 조직을 배양합니다.

결합되지 않은 1차 항체를 씻어냅니다.

그런 다음 헤파란 설페이트에 부착된 1차 항체에 결합하는 형광단 접합 2차 항체를 추가합니다.

결합되지 않은 항체를 제거합니다.

형광 염료를 사용하여 핵을 염색합니다.

마지막으로, 형광 현미경을 사용하여 아밀로이드 플라크 내의 형광 표지된 헤파란 설페이트와 병든 조직 단면의 파란색 핵을 시각화합니다.