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신경과학
0 조회수 • 1:28 분 • March 4th, 2025
다양한 연령대의 개인으로부터 수집한 뇌척수액(CSF)으로 시작하십시오.
샘플을 원심분리하여 세포 파편을 펠릿화하고 상층액을 수집합니다.
상등액에는 뉴런 생성 또는 신경 발생에 관여하는 단백질이 포함되어 있습니다.
스트렙타비딘으로 코팅된 멀티웰 플레이트를 예로 들어 보겠습니다. 불특정 바인딩을 방지하기 위해 차단 에이전트를 추가합니다.
특정 신경 발생 관련 단백질에 선택적으로 비오틴 표지된 포획 항체를 추가합니다.
항체를 streptavidin에 결합하기 위해 교반으로 배양한 다음 플레이트를 세척합니다.
루테늄 표지 검출 항체와 함께 CSF 샘플을 웰에 추가한 다음 교반으로 배양합니다.
특정 신경 발생 관련 단백질은 결합하여 항체를 포획하고 동시에 검출 항체와 상호 작용합니다.
플레이트를 철저히 세척하고 감지 버퍼를 추가하십시오.
플레이트를 이미징 시스템에 놓습니다.
검출 버퍼는 루테늄에서 발광을 유발합니다.
샘플 전체에서 광 강도의 감소는 신경 발생 관련 단백질 수준의 노화와 관련된 감소를 나타내며 신경 발생의 감소를 확인합니다.