JoVE 실험 백과사전
신경과학
0 조회수 • 2:24 분 • August 29th, 2025
머리를 기울인 정위 고정 프레임에 마취된 마우스로 시작합니다.
마우스의 두피 절개는 소뇌와 뇌간 사이의 뇌척수액 또는 CSF로 채워진 공간인 대저수조를 덮고 있는 경막을 노출시킵니다.
집게를 사용하여 경막을 잡고 수조에 접근할 수 있는 작은 구멍을 만듭니다.
멸균 면봉을 사용하여 과도한 CSF를 제거합니다.
척수가 뇌간과 연결되는 해부학적 기준점을 식별한 다음 정위 좌표를 결정합니다.
치료 용액이 들어 있는 마이크로피펫을 잡고 있는 정위 암을 내립니다.
마이크로피펫을 수조를 통해 미리 결정된 좌표에서 뇌간으로 전진시킵니다.
용액을 천천히 주입하고 역류를 방지하기 위해 피펫을 잠깐 잡습니다.
치료 용액은 표준 정위 고정 방법으로는 도달하기 어려운 뇌간 및 상부 척수 부위에 직접 도달합니다.
열린 경막을 통해 상세한 랜드마크가 있는 뇌간의 등쪽 표면을 봅니다.
각진 겸자를 사용하여 후두골에서 아틀라스까지 뻗어 있는 경막을 잡은 다음 스프링 가위를 사용하여 경막에 약 0.5-1.5mm의 작은 구멍을 만듭니다. 경막이 열리면 멸균 면봉으로 과도한 뇌척수액을 배출합니다. 중심관이 제4뇌실로 열리는 지점인 obex는 표준 전후방 및 내외측 영점입니다.
정위 암을 사용하여 피펫 또는 주사기를 대상에 배치합니다. 등쪽의 팔을 등복부 영점에서 형성되는 등쪽 표면으로 내립니다. 그런 다음 피펫을 뇌간 위로 내리고 용액을 주입합니다.
3-50나노리터 사이의 부피를 사용할 때 바늘 자국을 피하기 위해 주사 후 1-5분 동안 바늘을 제자리에 두십시오. 그런 다음 정위 암을 사용하여 피펫이나 주사기를 들어 올리고 여러 표적에 대해 이 작업을 반복합니다.