배란을 억제하기 위해 깨어 있는 암컷 쥐의 뇌에 테트로도톡신을 미세 주입

증류수를 채운 마이크로 주사기를 가져와 마이크로 인젝터에 연결된 튜브에 연결합니다.

마이크로인젝터 팁에 물방울이 나타날 때까지 마이크로 시린지 플런저를 누른 다음 플런저를 약간 집어넣어 튜브에 에어 포켓을 만듭니다.

독소 비활성화 물질과 파라핀 필름을 적신 패드를 그 위에 놓습니다.

테트로도톡신을 파라필름에 피펫팅하고 마이크로인젝터로 흡인합니다.

마이크로 주사기를 마이크로 인젝션 펌프에 장착하고 마이크로 인젝터 팁에 방울이 나타날 때까지 플런저를 전진시킵니다. 방울을 버리십시오.

시상

하부에 가이드 캐뉼라를 이식한 깨어 있는 암컷 쥐를 잡습니다.

마이크로인젝터를 가이드 캐뉼라에 삽입합니다.

미세 주입을 수행합니다.

테트로도톡신은 시상하부 뉴런의 나트륨 채널을 차단하여 뉴런 발화를 방지합니다.

이 억제는 성선 자극 호르몬 방출 호르몬을 분비하는 뉴런을 억제하여 배란을 억제합니다.

역류를 방지하기 위해 마이크로인젝터를 제자리에 두십시오. 그런 다음 제거하고 가이드 캐뉼라의 캡을 교체하십시오.

주

입 속도와 총 주입 시간으로 미세 주입 펌프를 구성합니다. 그런 다음 2개의 10마이크로리터 해밀턴 주사기에 멸균 증류수를 채우고 PTFE 튜브 조각을 각 마이크로 인젝터의 튜브 커넥터에 삽입하여 튜브의 길이가 쥐의 움직임을 제한하지 않도록 합니다.

튜브를 해밀턴 주사기에 연결하고 마이크로 인젝터 끝에 물 한 방울이 보일 때까지 플런저를 누릅니다. 플런저를 집어넣어 튜브에 2cm 크기의 에어 포켓을 만듭니다. 비활성화 물질을 적신 패드와 그 위에 2 x 2cm 정사각형의 파라핀 필름을 놓습니다. 인젝터의 바늘과 필름 위의 튜브 1cm를 채울 수 있을 만큼 충분한 양의 TTX를 피펫팅합니다.

플런저를 부드럽게 집어넣어 TTX 방울을 흡수합니다. 마이크로 주입 펌프에 주사기를 장착하고 컨트롤을 사용하여 각 마이크로 인젝터 끝에 TTX 방울이 보일 때까지 플런저를 조작합니다. 수술 후 최소 3회 연속 주기를 보인 쥐만 주기 단계와 시간을 고려하여 사용하십시오.

쥐를 꽉 잡으십시오. 캐뉼라에서 캡과 폐쇄기를 제거합니다. 마이크로 인젝터를 가이드 캐뉼라에 삽입하고 동물을 케이지로 되돌립니다. 펌프를 켜고 미세 주입이 완료될 때까지 기다리십시오. 용액의 역류를 방지하기 위해 마이크로 인젝터를 2분 더 제자리에 두었다가 제거합니다. 폐쇄기를 교체하십시오. 모자를 쓰고 동물을 식민지 방으로 돌려보내십시오.