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신경과학
0 조회수 • 2:30 분 • August 29th, 2025
골 신경이 노출된 가열 패드 위에 마취된 신생아 쥐로 시작합니다.
신경의 원위 부위를 들어 올리고 염료와 혼합된 플라스미드 DNA 용액을 주입합니다. 염료는 플라스미드 전달을 추적하는 데 도움이 됩니다.
핀셋 모양의 전극을 신경 주위에 놓고 전극 팔 사이에 작은 간격을 유지합니다.
전류 전도를 위해 이 틈에 식염수를 도입합니다.
Schwann 세포에 일시적인 막 기공을 생성하는 신경 섬유를 둘러싼 전기 펄스를 가합니다. 그런 다음 전극 위치를 뒤집고 두 번째 전기 펄스를 적용합니다. 이것은 기공을 통한 플라스미드 DNA 진입을 향상시킵니다.
전기천공 후 세포막은 플라스미드를 다시 밀봉하고 가둡니다.
부위를 청소하고 피부 절개 부위를 밀봉하고 소독한 후 쥐가 회복될 수 있도록 합니다.
나중에 플라스미드 DNA는 핵으로 전위되어 슈완 세포 DNA에 통합되어 성공적인 유전자 전달을 가능하게 합니다.
바늘을 사용하여 신경의 원위쪽을 부드럽게 당겨 노출된 신경을 들어 올립니다. 유리 마이크로 피펫을 신경의 원위 부위에 삽입하고 신경이 녹색으로 나타날 때까지 약간의 양압을 가하여 DNA 용액을 주입합니다. 다음으로 핀셋 타입의 백금 전극을 신경에서 약 1-2mm 떨어진 곳에 배치합니다.
전극과 신경 사이의 틈을 0.9% 염화나트륨 용액으로 채웁니다. 전기천공기를 사용하여 주사 부위에 전기 펄스를 가합니다. 첫 번째 펄스 세트 후 전극을 뒤집고 다른 펄스 세트를 적용합니다.
그런 다음 0.9% 염화나트륨 용액으로 전기천공 부위를 청소합니다. 전기천공 후 시아노아크릴레이트 접착제로 절개 부위를 봉합합니다. 그런 다음 포비돈 요오드로 상처를 닦습니다.
동물에게서 안면 마스크를 제거하고 마취에서 완전히 회복될 수 있도록 최소 한 시간 동안 전기 워머에 두십시오