쥐 모델에서 척수 복구를 위한 자가 조립 펩타이드 및 신경 전구체 세포 주입

0 views • 4:18 min • August 29th, 2025

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경추 척수 손상이 있는 마취된 쥐를 정위 프레임에 고정합니다.

병변 부위는 손상된 축삭과 침윤된 면역 세포, 신경교세포 및 섬유아세포로 둘러싸인 체액으로 채워진 공동으로 구성되어 축삭 재성장과 기능 회복을 방해합니다.

척추 위의 피부를 소독하고 절개합니다. 근육을 해부하여 척수의 외부 덮개인 경막을 노출시킵니다.

척수 병변 부위를 드러내기 위해 경막에서 흉터 조직을 절제합니다.

자가 조립 펩타이드(SAP)가 들어 있는 미세 주사기를 병변 위에 놓고

정중선 한쪽의 병변 코어에 주입합니다.

균일한 분포를 위해 반대쪽에서 주입을 반복합니다.

다음으로, 병변 주변 부위에 신경 전구 세포(NPC)를 주입하여 염증이 있는 병변 코어를 피하여 NPC 생존율을 향상시킵니다.

단 주입되면 SAP는 세포외 기질을 모방하고 공동을 연결하는 스캐폴드로 자체 조립됩니다. 스캐폴드는 NPC의 생존과 조직 리모델링을 위한 신경 세포로의 분화를 지원합니다.

주사는 척수 손상 후 14일 후에 시행됩니다. 수술을 시작하기 전에 멸균수에 부피당 중량 1% 농도로 SAP를 준비하고 해밀턴 주사기에 부착된 100마이크로미터 유리 모세관에 용액을 채웁니다.

해밀턴 주사기를 정위 고정 프레임에 부착합니다. 쥐를 마취한 후 정위 프레임에 머리를 부착하고 이전과 같이 포비돈 요오드와 70% 알코올로 수술 부위를 소독합니다. 다시 한 번 피부를 연 후 한 쌍의 척추 근육을 조심스럽게 해부하고 견인기를 삽입합니다.

15번 메스를 사용하여 경막에서 흉터 조직을 제거하고 병변 부위를 다시 노출시킵니다. 그런 다음 날카로운 바늘 끝을 사용하여 경막을 조심스럽게 엽니다. 마지막으로 정체적으로 유리 모세혈관을 외상을 입은 척수에 2mm 깊이까지 삽입하고 SAP를 주입합니다.

SAP를 주입한 후 모세혈관을 주입 부위에 1분 동안 머물게 한 후 제거하여 주입된 용액을 수용할 수 있도록 조직이 늘어날 수 있도록 합니다. 그런 다음 다음 부위에서 주사를 반복합니다. 여기서, NPC는 성체 DS 적색 마우스의 뇌실주위 영역에서 분리되고 이전에 발표된 절차에 따라 배양되었습니다.

마이크로 주입 직전에 성장 배지의 NPC를 세포 이식을 위해 마이크로리터당 10배 3의 생세포에 50배 10의 농도로 희석하고 해밀턴 주사기의 유리 모세관에 로드합니다. NPC는 SAP 주입 직후 주입됩니다. 그렇게 하려면 해밀턴 주사기의 유리 모세관을 손상 부위의 0.2mm, 척수 등쪽 표면 아래 1.5mm에 삽입합니다.

분당 약 0.5마이크로리터의 속도로 2마이크로리터의 세포 현탁액을 주입합니다. 첫 번째 주사가 완료된 후 모세혈관이 이전과 같이 1분 동안 척수에 남아 있도록 합니다. 그런 다음 모세혈관을 집어넣고 인접한 부위로 옮기고 주입 절차를 반복합니다. 이전과 같이 잠시 기다린 후 모세혈관을 집어넣고 부상 부위로 2mm 이동합니다.

이 위치에서 2마이크로리터 주사를 두 번 수행합니다.

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Last updated: 25 July 2026