Cisterna Magna Injection을 통한 마우스 모델의 표적 약물 전달

형광 마커 유전자를 발현하는 마취된 마우스로 시작하여 정위 프레임에 고정합니다.

머리는 대뇌수조, 뇌척수액 또는 소뇌와 뇌간 사이의 CSF로 채워진 공간에 더 쉽게 접근할 수 있도록 아래쪽으로 기울어져 있습니다.

눈 연고를 바르고 목을 면도하고 살균하십시오.

정중선 절개를 하여 수조를 덮고 있는 막을 노출시킵니다.

수

조 마그나에 접근하기 위해 분리기로 조직을 집어넣습니다.

유도 약물로 채워지고 구부러진 바늘이 장착된 마이크로 주사기를 가져 가십시오.

바늘을 삽입하고 멤브레인에 구멍을 뚫어 수조에 도달합니다.

CSF 내에서 균일하게 분산되도록 약물을 천천히 주입합니다.

약물은 뇌 표면 세포에 들어가 마커 유전자의 발현을 유발하여 적색 형광 단백질을 생성합니다.

CSF 흐름은 약물이 더 깊은 뇌 영역으로 확산되는 것을 방지합니다.

형광 이미징은 표면 세포의 선택적 표지를 확인하여 CSF 노출 영역에 표적 약물 전달을 보여줍니다.

이소플루란 챔버에서 동물을 마취합니다.

그런 다음 마우스피스가 수술대 표면에서 약 30도 각도가 되도록 마우스 헤드 홀더를 조정하고 동물의 머리를 홀더에 고정합니다. 수조 마그나에 대한 접근성을 높이려면 머리를 아래쪽으로 기울인 상태에서 동물의 몸을 테이블 표면에서 약 30도 각도로 배치하여 신체의 나머지 부분과 120도 각도를 설정하고 목 뒤쪽을 확장하여 수조 마그나에 쉽게 접근할 수 있도록 합니다. 동물이 올바른 위치에 있으면 안과용 연고를 바르고 목 뒤쪽을 면도한 다음 알코올 물티슈와 베타딘으로 해당 부위를 소독합니다.

수술용 가위를 사용하여 후두골 높이에서 시작하여 후방으로 확장되는 정중선 절개를 합니다. 수조 위에 있는 경막막을 노출시키는 가는 끝 핀셋으로 정중선에서 옆으로 당겨 표면 결합 조직과 목 근육을 부드럽게 분리합니다. 시술 전반에 걸쳐 수조를 시각화할 수 있도록 작은 수술용 분리기를 배치합니다.

후두골의 꼬리 끝을 식별하고 이전에 구부린 바늘을 바로 아래에 삽입합니다. 경막에 구멍이 뚫리면 주사기를 동물의 몸과 평행하게 위쪽으로 부드럽게 당겨 바늘의 구부러진 끝이 표면 아래로 침투하도록 하여 더 나은 안정성을 보장합니다. 뇌척수액의 자연스러운 흐름을 방해하지 않도록 화합물을 천천히 주입하십시오.

주사 후 바늘을 1분 동안 안쪽에 두었다가 끝이 가는 집게를 사용하여 조심스럽게 제거합니다.