0 조회수 • 2:25 분 • August 29th, 2025
평평한 표면에 불활성 층으로 코팅된 마이크로웰 어레이로 시작합니다.
박테리아 세포의 현탁액을 어레이에 추가하여 웰에 정착할 수 있도록 합니다.
코팅을 벗겨내어 표면에 결합된 세포를 제거하고 웰 내에 국한된 세포를 유지합니다.
그런 다음 스페이서 사이에 마이크로웰 어레이를 고정합니다.
비접착성 코팅이 된 슬라이드를 가져와 합성 고분자와 완충액에 용해된 가교제를 포함하는 하이드로겔 전구체 용액을 그 위에 증착합니다.
슬라이드를 어레이에 뒤집고 배양합니다. 가교제는 폴리머와 반응하여 세포를 포획하는 다공성 하이드로겔을 형성합니다.
슬라이드를 제거하고 박테리아 성장을 지원하고 오염을 방지하기 위해 항생제가 포함된 배지에 어레이를 놓습니다.
갇힌 박테리아는 공간적으로 구별되는 콜로니로 증식합니다.
하이드로겔에는 자외선에 노출되면 끊어지는 광분해성 가교가 포함되어 있어 박테리아 콜로니의 선택적 추출을 위한 표적 하이드로겔 분해가 가능합니다.
마이크로웰 어레이 기질 위에 OD 600 0.1의 박테리아 세포 현탁액 700 마이크로리터를 시드하고 pH 8의 인산염 완충 식염수 ATGN 12.5 마이크로리터를 사용하여 이전에 입증한 대로 하이드로겔 전구체 용액을 만듭니다. 비반응성 과불화알킬화 유리 슬라이드에 전구체 용액 12.5마이크로리터를 피펫팅하고 세포가 접종된 마이크로웰 어레이 기질의 반대쪽 두 면에 2개의 38마이크로미터 강철 스페이서를 놓습니다. 그런 다음 전구체 용액 방울로 과불화알킬화 유리 슬라이드를 뒤집고 마이크로웰 기판 중앙에 물방울을 놓습니다.
실온에서 25분 동안 배양한 후 하이드로겔이 형성되면 마이크로웰 기질에서 유리 슬라이드를 부드럽게 제거하고 항생제가 보충된 ATGN 배지가 들어 있는 페트리 접시에 기질을 넣습니다.