세포외 소포(EVs)는 무엇인가요?

세포외 소포(EVs)는 다양한 생물 분자를 운반하는 세포가 방출하는 나노 크기의 입자입니다.

이 방법에서 유라닐 아세테이트는 왜 사용되나요?

유라닐 아세테이트는 EVs를 염색하여 TEM 하에서 더 나은 시각화를 위해 대비를 향상시키는 데 사용됩니다.

TEM을 사용하는 것의 중요성은 무엇인가요?

TEM은 고해상도 이미지를 제공하여 EV 형태 및 크기를 상세하게 검사할 수 있게 합니다.

EVs는 이미징을 위해 어떻게 준비되나요?

EVs는 이미징을 위해 TEM 그리드에 적용하기 전에 농축 및 정제됩니다.

이 방법을 다른 생물체의 EVs에 사용할 수 있나요?

네, 이 방법은 다양한 생물학적 출처의 EVs에 적용할 수 있습니다.

투과전자현미경을 이용한 시아노박테리아 세포외소포의 시각화

JoVE Encyclopedia of Experiments

Microbiology

0 views • 2:01 min • August 29th, 2025

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폴리비닐 포멀 레진 코팅 투과 전자 현미경 또는 TEM 그리드를 깨끗한 플라스틱 필름 위에 놓습니다.

농축되고 정제된 세포외 소포 또는 EV, 나노 크기의 막 결합 입자의 현탁액을 그리드에 추가합니다.

이 EV는 시아노박테리아에 의해 분비되며 막 내에 거대분자를 운반합니다.

EV가 수지 코팅 표면에 흡착될 수 있도록 그리드를 배양합니다.

깨끗한 여과지로 그리드 가장자리를 만져 과도한 현탁액을 흡수합니다.

유라

닐 아세테이트 위에 그리드를 띄워 부착된 소포를 염색합니다.

우라닐 아세테이트가 소포를 둘러싸고 있어 이미징 중 대비를 향상시키는 어두운 윤곽을 만듭니다.

그리드를 제거하고 여과지를 사용하여 과도한 얼룩을 흡수합니다.

잔

여 얼룩을 제거하기 위해 초순수로 그리드를 씻으십시오. 세탁을 반복한 다음 자연 건조시키십시오.

마지막으로 TEM을 사용하여 EV를 시각화하여 형태, 크기 및 순도를 평가합니다.

5마이크로리터의 소포를 조심스럽게 바르고 5분 동안 그대로 두십시오. 그리드의 가장자리를 깨끗한 여과지에 대고 샘플을 제거합니다.

플라스틱 필름으로 덮인 평평한 표면에 20-50마이크로리터의 2%우라닐 아세테이트를 피펫팅합니다. 그런 다음 그리드를 그 위에 2분 동안 떠 놓습니다. 여과지를 사용하여 우라닐 아세테이트를 제거하고 초순수 한 방울에 잠시 띄워 씻습니다.