액체 배양에서 Streptomyces venezuelae 포자의 준비 및 분리

0 조회수2:36 • September 26th, 2025

샘이 들어 있고 Streptomyces venezuelae 박테리아의 전체 수명 주기를 지원하는 영양이 풍부한 배지로 채워진 플라스크로 시작하십시오.

박테리아 포자를 배지에 접종하고 진압하면서 배양하여 적절한 통기 및 영양분 분배를 보장합니다.

스프링은 혼합을 향상시켜 균일하고 일관된 성장을 지원합니다.

포자는 영양분을 흡수하고 발아하여 끝에서 확장되고 균사로 분기되어 균사 구조로 발달하는 배아관을 생성합니다.

영양분이 제한됨에 따라 유기체는 분열하여 휴면 생식 세포인 포자를 생성하는 특별한 포자 형성 균사를 생성합니다.

위상차 현미경으로 관찰하여 균사체 조각과 포자의 존재를 확인합니다.

배양액을 원심분리하여 더 무거운 균사체 파편을 펠릿화하여 상층액에 더 가벼운 포자를 남깁니다.

상청액을 마이크로튜브로 옮기고 얼음 위에 올려 조기 발아를 방지합니다.

포자 현탁액을 신선한 배지에 희석하고 추가 사용할 때까지 추운 조건에서 보관하십시오.

보충된 성장 배지 30밀리리터에 이미징할 S.베네수엘라 균주의 포자 10마이크로리터를 접종합니다. 세포의 일관된 성장과 포자 형성을 위해 충분한 통기를 허용하기 위해 배플 플라스크 또는 스프링이 포함된 플라스크를 사용하십시오.

세포를 섭씨 30도 및 250RPM에서 35-40시간 동안 배양합니다. 준비가 되면 액체 장착형 위상차 현미경을 통해 균사체 조각과 포자를 볼 수 있어야 합니다. 탁상용 원심분리기에서 배양액 1밀리리터를 400배 G로 1분 동안 원심분리하여 균사체와 더 큰 세포 조각을 펠릿화합니다.

그런 다음 포자 현탁액을 포함하는 약 300마이크로리터의 상청액을 새로운 1.5mm 튜브로 옮기고 튜브를 얼음 위에 놓습니다.