Light-patterned Hydrogel Degradation을 사용한 표적 박테리아 콜로니 분리

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형광을 방출하도록 유전자 변형된 갇힌 박테리아 콜로니를 포함하는 광분해성 하이드로겔 층이 있는 커버슬립을 가져 가십시오.

커버슬립을 홀더에 넣습니다.

샘플 탈수를 방지하기 위해 배지를 추가합니다.

명시야 현미경 아래에서 관심 있는 단일 콜로니에 초점을 맞춥니다.

적절한 소프트웨어를 사용하여 콜로니 주변에서 세포 추출을 위한 조명 패턴을 설계하여 하이드로겔의 구조적 결합을 분해하고 세포에 대한 UV 노출을 최소화합니다.

UV 광선 강도와 노출 시간을 조정합니다.

표적 콜로니의 방출을 촉진하는 노출된 영역에서 하이드로겔의 구조적 결합을 끊기 위해 UV 광선 노출을 시작합니다.

형광 필터를 사용하여 콜로니를 식별합니다.

튜브 팁을 그 자리에 놓고 다른 쪽 끝을 주사기에 연결합니다.

명시야 모드로 전환하고 주사기를 사용하여 방출된 콜로니를 흡인합니다.

추가 분석을 위해 콜로니를 튜브로 옮깁니다.

샘플을 PDMS 홀더에 넣고 샘플 위에 정의된 배지를 추가하여 샘플 탈수를 방지하고 방출된 세포에 캐리어 솔루션을 제공합니다. 교정 미러를 제자리에 놓은 후 현미경 초점을 조정하여 하이드로겔 또는 마이크로웰 어레이 내의 콜로니의 선명한 이미지를 얻고 검사하여 관심 있는 콜로니 또는 웰을 식별합니다.

여기에서 카메라 뷰가 샘플 내부의 콜로니를 표시하는 동안 조명 패턴을 설계하여 세포 추출을 위한 다양한 패턴을 테스트하고 정의된 패턴을 저장합니다. 그런 다음 세션 제어 섹션을 선택하고 패턴화된 조명 도구 제품 이름이 있는 탭 아래에 저장된 시퀀스를 추가합니다. 패턴을 자극하는 옵션을 선택하여 원하는 노출 위치를 보고 조정합니다.

그런 다음 LED 제어 탭에서 광도를 60%로, 노출 시간을 40초로 조정하고 노출 프로세스를 시작합니다. 하이드로겔 분해를 실시간으로 모니터링하고 명시야 모드로 모니터링하여 세포 방출을 보장합니다. 방출된 세포를 수집하려면 현미경 필터를 명시야에서 TRITC로 변경하여 샘플의 노출 영역을 육안으로 시각화합니다.

노출된 영역을 찾으면 튜브의 끝을 조사된 지점에 놓은 다음 현미경 필터를 다시 명시야로 변경하여 세포 회수를 실시간으로 모니터링합니다. 튜브의 다른 쪽 끝에 부착된 주사기를 사용하여 방출된 세포가 포함된 200마이크로리터의 용액을 조심스럽게 빼내고 DNA 분석 또는 도금을 위해 용액을 1.5mm 원심분리기 튜브로 옮깁니다

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Last updated: 18 July 2026