0 조회수 • 2:58 분 • September 26th, 2025
질 환경을 조절하여 감염에 대한 감수성을 증가시키는 호르몬으로 치료받은 암컷 마우스를 예로 들어 보겠습니다.
쥐가 앞발로 케이지를 잡는 동안 꼬리를 들어 올려 뒷다리를 들어 올리고 질 입구를 노출시킵니다.
혐기성 완충제로 질 내강을 헹구어 죽은 상피 세포 및 내인성 질 미생물과 함께 병원균에 대한 보호 장벽인 점액을 씻어냅니다.
체액 손실을 최소화하기 위해 마우스를 구속한 상태에서 혐기성 박테리아 병원균의 현탁액을 질에 즉시 접종합니다.
공동 접종의 경우 이전과 동일한 부피를 사용하여 다른 혐기성 박테리아 병원체의 현탁액을 투여합니다.
교차 오염을 방지하기 위해 접종된 마우스를 접종하지 않은 마우스와 별도로 보관하십시오.
접종 후 박테리아는 질 상피에 부착되어 콜로니로 성장하며 숙주 면역 반응에 대한 장벽 역할을 하는 보호 생물막층을 형성합니다.
70마이크로리터의 멸균 혐기성 PBS를 마우스 번호로 표시된 1.5밀리리터 미세 원심분리기 튜브에 피펫팅하여 혐기성 챔버에서 질 세척 튜브를 준비합니다.
튜브를 단단히 닫고 챔버에서 꺼냅니다. 질 세척을 하려면 먼저 앞발로 잡을 수 있는 케이지 위에 마우스를 올려 놓습니다. 그런 다음 꼬리의 중간 부분을 부드럽게 잡고 뒷다리가 약간 올라가 질 입구가 노출되도록 들어 올립니다.
라벨이 붙은 세척 튜브에서 50마이크로리터의 PBS를 끌어낸 후 피펫 팁을 질 내강에 2-3mm 부드럽게 삽입하여 3-4회 피펫팅하여 PBS로 세척합니다. 그런 다음 세척 재료를 사용하지 않은 PBS 20마이크로리터의 나머지 20마이크로리터와 함께 원래 세척 튜브로 다시 옮깁니다. 이 질 세척 직후, 20마이크로리터의 박테리아 현탁액 또는 비히클 대조군을 질로 옮겨 각 마우스를 접종합니다.
두 가지 다른 박테리아 균주를 사용한 공동 접종 실험의 경우 균주를 미리 혼합하는 대신 각 박테리아 현탁액 10마이크로리터를 별도로 접종합니다. 투여된 부피가 질 입구에 즉시 축적되는 것을 방지하려면 마우스의 뒷부분을 10-20초 동안 계속 들어 올리십시오. 접종된 마우스를 새 케이지 또는 이미 접종된 케이지 메이트로 옮기고 다른 마우스에 대해 절차를 반복합니다.