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미생물학
0 조회수 • 2:30 분 • September 26th, 2025
다양한 토마토 계통에서 박테리아 내성을 스크리닝하려면 멸균 조건에서 자란 10일 된 토마토 묘목부터 시작하십시오.
이 묘목은 새로운 실제 잎과 확립된 뿌리를 보여줍니다.
식물 표면에 접종물이 균일하게 퍼지는 것을 촉진하기 위해 계면활성제와 혼합된 병원성 박테리아로 두 균주를 모두 범람시킵니다. 접종물과의 묘목 접촉을 최대화하기 위해 플레이트를 기울이고 휘젓습니다.
여분의 접종물을 제거하고 플레이트를 다시 밀봉한 다음 성장 챔버에서 배양합니다.
박테리아는 기공을 통해 들어가 잎 세포 사이의 세포외 공간인 아포플라스트에 식민지를 형성합니다.
박테리아는 식물 면역 반응을 억제하기 위해 식물 세포에 이펙터 단백질을 주입합니다.
감수성 균주는 이러한 이펙터를 감지하지 못하여 박테리아 증식과 박테리아 독소로 인한 식물 조직 손상을 허용합니다.
저항성 균주는 이펙터를 인식하고 활성 산소종을 생성하여 박테리아를 죽입니다.
배양 후 내성 균주는 지속적인 성장을 보이는 반면, 감수성 균주는 발달이 멈춘 것으로 나타났습니다.
10일 된 묘목이 담긴 플레이트를 성장실에서 생물안전 캐비닛으로 옮기고 수술용 테이프를 제거합니다. 그런 다음 6밀리리터의 접종물을 각 플레이트에 옮깁니다.
피펫 팁으로 묘목을 접종물에 부드럽게 밀어 넣고 3분 동안 타이머를 시작합니다. 양손에 접시 하나를 잡고 접시 앞쪽을 아래로 기울여 묘목의 자엽과 잎을 잠깁니다. 접종물을 옆으로 5-7번 휘젓은 다음 접시를 뒤로 젖혀 뿌리를 접종으로 덮습니다.
플레이트를 다시 아래로 기울이고 총 3분 동안 주기를 반복합니다. 접시에서 접종물을 붓고 평평한 표면에 놓고 잔여 접종물을 두 번째로 붓습니다. 플레이트를 다시 포장하고 성장실에 다시 넣습니다.