살모넬라 티피무리움 배양 준비

병원성 박테리아인 살모넬라 티피무리움이 들어 있는 배양 플레이트를 가져 가십시오.

멸균 박테리아 루프를 사용하여 배양 순도를 보장하기 위해 잘 분리된 단일 콜로니를 선택하고 이를 뇌 심장 주입 국물에 접종합니다.

적절한 통기와 균일한 영양분 분포를 위해 쉐이킹과 함께 배양하여 박테리아 증식을 촉진합니다.

하룻밤 배양액을 신선한 국물로 희석하여 영양소 고갈을 방지하고 기하급수적인 성장을 유지합니다.

흔들면서 계속 배양하십시오.

분광 광도계를 사용하여 박테리아 성장을 추적하기 위해 광학 밀도(OD)를 측정합니다.

배양액이 약 1의 OD에 도달하도록 합니다. 이는 박테리아가 영양분을 적극적으로 활용하여 급속한 증식을 겪는 기하급수적인 성장 단계를 나타냅니다.

배양액을 튜브로 옮기고 원심분리하여 박테리아를 분리합니다.

상청액을 버리고 박테리아의 무결성을 보존하기 위해 박테리아를 완충액에 재현탁합니다.

원심분리하여 잔류 배지를 제거합니다.

박테리아를 신선한 완충액에 재현탁하여 균일하고 오염이 없는 현탁액을 얻습니다.

살모넬라 티피무리움 배양을 시작하려면 박테리아 루프를 사용하여 단일 박테리아 콜로니를 5밀리리터의 뇌 심장 주입 국물에 접종합니다. 그런 다음 현탁액을 섭씨 37도 인큐베이터에서 밤새 흔들면서 배양합니다. 다음날 이 박테리아 현탁액 1밀리리터를 원추형 플라스크에 담긴 19밀리리터 BHI 국물에 옮깁니다.

섭씨 37도의 인큐베이터에서 흔들면서 다시 배양합니다. OD₆₀₀ 이 1에 도달하면 인큐베이터에서 플라스크를 제거하고 배양액을 50밀리리터 튜브로 옮깁니다. 그런 다음 튜브를 섭씨 4도에서 5,400g에서 15분 동안 원심분리합니다.

상청액을 제거한 후 박테리아 펠릿을 10밀리리터 멸균 PBS에 재현탁합니다. 원심분리를 한 번 반복한 후, 펠릿을 4.9밀리리터의 PBS에 재현탁합니다.