0 조회수 • 2:07 분 • October 30th, 2025
살아있는 녹 농 미세낭송 세포와 죽은 녹농 미세낭송 세포를 별도로 채취하십시오.
표본을 혼합하여 결합된 모집단을 만듭니다.
Microcystis에는 살아있는 세포에서는 손상되지 않지만 죽은 세포에서는 분해되는 자가형광 색소인 피코시아닌이 포함되어 있습니다.
샘플을 소용돌이치게 하여 덩어리를 부수고 균일한 단일 세포 현탁액을 생성합니다.
세포막 불투과성 핵산 결합 형광 프로브를 추가하고 광표백을 방지하기 위해 어두운 곳에서 샘플을 배양합니다.
프로브는 손상된 막을 통해 죽은 세포에 선택적으로 들어가 세포내 DNA에 결합합니다.
적절한 여기 파장 레이저를 사용하여 피코시아닌 자가형광 및 핵산 프로브 형광을 측정하기 위해 유세포 분석기를 통해 샘플을 분석합니다.
살아있는 세포는 강한 피코시아닌 자가형광을 방출하지만 프로브 신호는 나타내지 않습니다.
대조적으로, 죽은 세포는 색소 방출이 감소하고 프로브 형광이 높아져 막 손상을 확인합니다.
이를 통해 죽은 세포에서 색소가 풍부한 살아있는 세포를 식별할 수 있습니다.
분자 프로브 세포 흡수를 최적화하려면 이전에 준비된 단일 배양의 절반을 죽은 대조군을 생성하기 위한 적절한 조건에 노출시킵니다. 샘플 미세 환경의 변화를 확인하여 배양의 죽음을 확인합니다. 그런 다음 방금 시연한 대로 식민지 형성을 분해합니다.
다음으로, 녹색 및 주황색 핵산 프로브의 형광을 기록할 수 있는 검출기와 함께 488나노미터 레이저를 선택합니다. 그리고 640나노미터 레이저는 각각의 검출기를 통해 피코시아닌 신호를 기록합니다.