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미생물학
0 조회수 • 2:48 분 • October 30th, 2025
낭포성 섬유증(CF)은 폐에 두껍고 끈적끈적한 점액이 축적되어 병원성 미생물 성장을 지원하는 가래를 형성하는 유전 질환입니다.
인공 CF 가래를 준비하려면 주요 생화학적 특성을 가진 용액을 복용하십시오.
뮤신 믹스에는 고분자량 당단백질인 뮤신이 함유되어 있어 CF 가래 점도를 복제하고 미생물 부착을 촉진합니다.
화학 혼합물은 미생물 대사를 지원하기 위해 이온과 포도당을 공급합니다.
생물학적 혼합물은 미생물 성장을 위한 영양분을 제공합니다.
모두 결합하여 인공 가래 배지(ASM)를 형성합니다.
완충제를 첨가하여 병원체 생존에 유리한 약산성 pH를 유지합니다.
매체 멸균의 경우 ASM을 멤브레인 필터가 있는 진공 여과 챔버로 옮깁니다.
뮤신 응집을 방지하고 필터 막힘을 방지하기 위해 교반 상태에서 필터링합니다.
진공은 필터를 통해 매체를 끌어당겨 미생물 오염 물질과 거대 분자 응집체를 제거합니다.
ASM은 CF 관련 미생물을 배양할 준비가 되었습니다.
ASMM이 들어 있는 1리터 병에 250밀리리터의 ASCM을 첨가하여 인공 가래 배지를 준비합니다. 그런 다음 250밀리리터의 ASBM을 중간 병에 추가합니다. 염기성 1몰 MOPS 완충액으로 배지를 적정하여 pH 종이에서 pH 6.3에 도달합니다.
여과될 때까지 인공 가래 배지를 섭씨 4도에서 냉장 보관합니다. 그런 다음 여과 과정을 시작하려면 여과되지 않은 인공 가래 배지 200밀리리터를 0.22마이크로미터 기공 크기 필터가 있는 진공 여과 시스템으로 옮깁니다. 여과 시스템을 진공 펌프에 연결한 후 진공 펌프를 켭니다. 그런 다음 챔버를 궤도 셰이커에 놓고 섭씨 90도의 냉장실에서 분당 4회전으로 흔듭니다.
막힘 문제를 극복하기 위해 350밀리리터의 배지를 여과한 후 필터를 교체하십시오. 상당한 양을 여과한 후 여과를 위해 150밀리리터 배지를 추가하십시오. 모든 매체가 여과될 때까지 추가 챔버로 여과를 반복합니다.