시아노박테리아 플라스토소블의 밀도 구배 정제

0 조회수2:15 • September 26th, 2025

플라스토소블은 시아노박테리아의 세포질에 있는 지질이 풍부한 물방울입니다.

그들은 구조 및 효소 단백질이 내장된 양친성 지질 단층으로 둘러싸인 소수성 코어 내에 중성 지질을 저장합니다. 저장된 지질은 스트레스 중에 동원되어 세포 기능을 지원합니다.

이를 분리하려면 시아노박테리아에서 얻은 조한 편성소구 분획으로 시작하십시오. 이 분획은 식장구가 풍부하며 일부 잔류 오염 단백질을 포함합니다.

이 분획을 밀도가 높은 자당 용액과 혼합하고 초원심분리기 튜브로 옮깁니다.

불연속적인 밀도 구배를 만들기 위해 더 가벼운 자당 용액으로 오버레이합니다.

형성소구의 열 분해를 방지하기 위해 추운 조건에서 고속으로 원심분리합니다.

구배는 밀도에 따라 구성 요소를 분리합니다: 지질이 풍부한 저밀도 플라스토소블은 상단으로 떠오르고 밀도가 높고 단백질이 풍부한 오염 물질은 가라앉습니다.

정제된 plastoglobules를 수집하고 구조를 보존하기 위해 냉동 배지에서 급속 냉동합니다.

장기간 사용하려면 초저온에서 보관하십시오.

시아노박테리아로부터 순수한 배형소체를 수확하려면 앞서 언급한 바와 같이 조 배형구 500마이크로리터, 배지 R 0.7 750마이크로리터 및 배지 R 0.2 750마이크로리터를 사용하여 자당 구배를 만듭니다. 원심분리 후, 순수한 플라스토소블을 1.5밀리리터 튜브에 모으고 순수한 플라스토글로불을 분취합니다. 완료되면 순수한 plastoglobules 분취량을 액체 질소에 급속 냉동하고 섭씨 영하 80도에서 직접 보관하거나 건조 분말로 동결건조합니다.