주사기 기반 압력 방법을 이용한 부유성 박테리아 추출

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미생물학

0 조회수 • 2:28 분 • November 28th, 2025

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박테리아가 미리 접종된 애기장대(Arabidopsis plant) 식물을 가져와 식물과 미생물의 상호작용을 연구합니다.

이 박테리아들은 식물 세포 사이의 세포 간 공간인 아포플라스트(apoplast)에서 증식하며 미세 집단을 형성합니다.

세포증 정착이 확립되면 잎을 절제하여 바늘 없는 주사기에 넣으세요.

조직을 덮기 위해 증류수를 넣으세요.

플런저를 넣고, 주사기를 세운 뒤 두드린 뒤 플런저를 조절해 갇힌 공기를 빼내세요.

끝부분을 파라필름으로 밀봉해 아포플라스트 추출을 위한 밀폐 챔버를 만듭니다.

플런저를 눌러 조직이 어두워질 때까지 양압을 가하세요. 이는 압축과 물이 세포 간 공간으로 침투하여 박테리아를 밀어내는 신호입니다.

다음으로, 플런저를 당겨 조직 매트릭스를 팽창시키고 액체와 박테리아를 끌어내어 음압을 가하세요.

압력 사이클을 반복하여 미세한 군집을 교란시키는 전단력을 생성하고, 식물 조직을 손상시키지 않고 박테리아를 방출합니다.

주사기를 열어 퍼진 박테리아가 포함된 세포증액을 채취하여 추가 분석을 진행하세요.

접종 4일 후, 애기장대 식물의 공중 부분이나 콩 식물에서 접종된 잎을 잘라내어 바늘 없이 20밀리리터 주사기에 넣습니다.

콩잎의 경우, 잎을 말아 아브사이드 면을 바깥쪽으로 남겨두세요. 조직을 덮을 만큼 증류수를 충분히 넣으세요. 그 후 주사기를 세운 플런저를 삽입하고, 배럴을 부드럽게 두드려 공기가 끝 근처에 집중될 때까지 두드리며, 공기를 제거한 후 주사기 배럴 끝을 파라핀 필름으로 덮습니다.

이제 플런저를 조심스럽게 눌러 양압을 만들어 조직이 더 어두워질 때까지 하세요. 그 다음 플런저를 당겨 음압을 만듭니다. 파라핀 필름과 플런저를 제거하고 아포플라스트로 추출된 박테리아가 포함된 액체를 모으세요.

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마지막 업데이트: 22 8월 2026