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미생물학
0 조회수 • 1:59 분 • November 28th, 2025
영양분이 풍부한 배지에서 키운 병원성 박테리아인 비브리오 콜레라에(Vibrio cholerae ) 균주를 하룻밤 배양하는 것부터 시작하세요.
세포를 원심분리해서 세포를 펠릿으로 만든다. 세포외 화합물이 포함된 상청액을 제거하고 펠릿을 식염수에 다시 담가세요.
다음으로, 멸균 와이어 접종기를 배양에 담가 운동성 한천에 수직으로 꽂아 박테리아를 측면 확산 없이 표면 아래에 침착시킵니다.
교차 오염을 방지하기 위해 각 균주마다 접종기를 화염 멸균하세요.
박테리아가 운동성 한천을 통과할 수 있도록 배양하세요.
한천에는 트리페닐테트라졸륨 클로라이드(TTC)가 포함되어 있는데, 이는 대사 활성화 세포에 의해 환원되면 붉게 변하는 산화환원 지표입니다.
운동성 변형은 넓은 영역에서 TTC를 감소시켜 큰 적색 영역을 형성하는 반면, 운동성 없는 변형은 찌르기 선에만 국한된 착색을 보입니다.
적색 구역의 크기와 분포는 각 균주의 운동성을 나타냅니다.
하룻밤 배양에서 얻은 세포 펠릿을 세척하세요. 운동성 한천 플레이트를 접종하기 위해 세척액 배양액에 접종 스탭을 삽입하고 배지에 수직으로 삽입합니다.
한천을 찌르는 동안 접종 자루가 휘지 않도록 주의하세요. 각 접종 사이에는 분젠 버너로 와이어 스탭을 소독하세요. 플레이트를 뚜껑 쪽이 위로 향하게 하여 37도에서 14-24시간 부양하세요.
14시간 후에는 배양 과잉 증식을 방지하기 위해 운동성 플레이트를 면밀히 관찰하세요.