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미생물학
0 조회수 • 2:27 분 • November 28th, 2025
병원성 박테리아인 비브리오 콜레라의 별도 배양을 생각해 보자. 이 박테리아는 고전형, 야생형 엘 토르, 그리고 엘 토르 변종으로, 각각 유전적으로 구별되는 하위 그룹을 대표한다.
각 배양물을 특수 배지로 채운 튜브에 접종하여 Voges-Proskauer(VP) 분석법을 수행합니다.
세균 증식을 촉진하기 위해 흔들면서 배양하세요.
야생형 엘 토르는 배지에서 포도당을 발효시키고 아세톤을 생성하는 반면, 고전형 및 변종 생물형은 그렇지 않습니다.
다음으로 각 튜브에 α-나프톨과 수산화칼륨을 넣고 충분히 섞은 후 배큐합니다.
수산화칼륨이 존재하면, 대기 중 산소가 아세톤의 산화를 디아세틸로 촉매합니다.
디아세틸은 매체 내 구아니딘 그룹을 포함한 화합물과 반응하여 분홍빛이 도는 붉은색 제품을 형성하며, 그 강도는 α-냅톨에 의해 강화됩니다.
색상 발달은 야생형 El Tor 생물형의 특징인 양성 VP 반응을 나타내며, 고전 및 변종 생물형은 색상 형성이 없음을 나타냅니다.
4밀리리터 메틸 레드 보게스-프로스카우어 또는 MR-VP 육수를 4밀리리터 MR-VP 육수에 피펫팅하여 멸균 배양관에서 4밀리리터 MR-VP 육수에 접종하고, 225rpm 셰이커 인큐베이터에서 37도 섭씨에서 12-16시간 동안 에어레이션하여 배양합니다. 다음으로, 각각 MR-VP 1박 배양 1밀리리터에 1밀리리터 알파-냅톨 150마이크로리터(부피당 5% 무게)와 40% 무게 40% 중량의 수산화칼륨 50마이크로리터를 무균 배양관에 첨가합니다.
그다음 튜브를 잠시 소용돌이로 돌리세요. 튜브를 상온에서 최대 4시간 동안 두어 색이 변할 때까지 두세요.
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