마이크로플루이딕 장치를 이용한 박테리아 운동성 평가

흡입관이 박테리아 이동을 위한 다공성 채널로 이루어진 마이크로플루이딕 챔버에 연결된 마이크로플루이딕 장치를 생각해 봅시다.

챔버는 출구 튜브를 통해 주사기 펌프에 연결된 관측실과 연결됩니다.

공기방울을 제거하기 위해 챔버를 완충제로 충분히 채워주세요.

장치를 현미경 스테이지에 올려놓고 대물렌즈를 관찰실 위에 위치시킵니다.

현미경 설정을 조정하여 개별 박테리아 세포를 명확히 시각화하세요.

유입 튜브를 형광 표지된 박테리아 현탁액에 넣으세요.

흐름을 시작해 박테리아를 미세유체 챔버로 끌어들이고, 박테리아는 다공성 채널을 통해 관측 챔버에 도달합니다.

관찰실을 정기적으로 영상으로 촬영하세요.

시간이 지남에 따라 다공성 매트릭스를 통과하는 박테리아의 비율을 나타내는 돌파 곡선을 생성합니다.

마이크로플루이딕을 진공 상태에서 제거하여 현미경 스테이지에 올려놓으세요. 주사기 펌프를 사용해 운동성 완충제를 충분히 채워주세요.

밝은 필드 현미경 또는 위상 차이를 사용하여 배율을 조절하여 개별 박테리아 세포를 시각화하고 관측 채널의 중심에 초점을 맞추세요. 빛 경로 설정을 형광 현미경으로 바꿔. 초점을 조절해 오프셋과 카메라 노출 시간을 조절해 개별 박테리아 세포를 분해하는데, 이 경우 100밀리초입니다.

다음으로, 입구 튜브를 박테리아 현탁액이 들어 있는 2밀리리터 튜브에 삽입합니다. 펌프 방향을 반대로 돌려 분당 1마이크로리터의 유량으로 서스펜션을 빼내기 시작하세요.

관측 채널 전체의 단면을 스캔하여 매분 한 장씩 이미지를 기록합니다.