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미생물학
0 조회수 • 2:12 분 • November 28th, 2025
영양분이 풍부한 배지와 미리 수화된 발효성 섬유가 들어 있는 혐기성 챔버 안에 튜브를 삽입하는 것부터 시작하세요.
관 내부의 산소 부족 환경은 인간 대장의 혐기성 환경을 모방합니다.
다음으로, 장내 미생물이 포함된 희석되고 균질화된 대변 샘플을 튜브에 넣고 배큐합니다.
튜브를 정기적으로 뒤집어 미생물과 섬유를 섞으세요.
배양 과정에서 미생물은 무산소적으로 섬유를 대사하고 발효시켜 단쇄 지방산과 기타 대사산물을 생성하여 배지의 pH를 낮춥니다.
발효 혼합물에서 정기적으로 알리코트를 채취하여 대사물 생성을 모니터링하고 pH를 점검하세요.
알리코트를 저온에서 원심분리하여 미생물 바이오매스를 펠릿으로 분리하세요.
대사산물과 단쇄 지방산이 포함된 상환액을 신선한 튜브로 옮깁니다.
미생물 생체량과 상원액을 액체 질소에 냉동하세요.
마지막으로, 샘플을 낮은 온도에서 보관하여 추가 분석을 하세요.
접종관은 혐산소 챔버 내에서 37도 섭씨로 유지하고, 섬유와 접종 물질을 다시 부드럽게 뒤집어 1시간에 한 번 부드럽게 뒤집어 재현지하세요. 3, 6, 9, 또는 24시간 후에 적절한 양의 발효 배지를 꺼내 샘플을 14,000g 속도로 4도 섭씨에서 10분간 원심분리합니다.
즉시 상청액과 펠릿을 액체 질소에 냉동한 후, 급동 후 단쇄 지방산 분석용으로, 미생물군 분석용 펠릿을 영하 80도 섭씨에서 보관하세요.