세균 노출 후 C. elegans 의 장 투과성 평가

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미생물학

0 조회수 • 2:45 분 • March 31st, 2026

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

C를 가져가세요. 영양분이 풍부한 한천 배지에서 배양된 엘레간스 벌레. 대장균은 대조군, Pseudomonas aeruginosa는 병원체 질환입니다.

부화 기간 동안 벌레는 장 내강에 서식하는 박테리아를 먹습니다.

대조군에서는 장 상피가 온전하게 유지되지만, 병원체에서 방출된 독소가 상피 손상을 일으킵니다.

벌레를 완충제로 세척한 후, 형광 추적자와 열로 불활성화된 박테리아를 보충한 플레이트에 옮기세요.

대조군에서는 섭취한 형광 추적자가 장내에 남아 있는 반면, 병원체에 감염된 벌레에서는 손상된 상피를 가로질러 체강으로 들어갑니다.

벌레를 다시 씻고 새 접시에 올려놓으세요. 그 후 세포 구조를 보존하기 위해 고정제가 포함된 다중 웰 분석판으로 옮깁니다.

고정제를 제거하세요. 그 다음 촬영용 마운팅 매체를 추가하세요.

형광 영상 시스템을 사용해 관찰하세요.

P의 체강 내 형광 증가. 아에루기노사에 노출된 벌레는 병원체에 의해 유도된 장 투과성을 나타냅니다.

나이에 맞춰 동기화된 L4 유충을 S-버퍼로 세척하고, 약 500마리의 벌레를 다양한 박테리아와 화학물질이 포함된 NGM 플레이트로 옮깁니다. 그 후 플레이트를 섭씨 20도에서 48시간 동안 배양합니다.

열로 비활성화된 E를 2밀리리터 혼합하여 FITC-덱스트란 보충 플레이트를 준비합니다. 대장 에 4밀리그램의 FITC-덱스트란이 들어갔습니다. 혼합물을 20개의 신선한 NGM 한천 플레이트 각각에 100마이크로리터씩 추가하고, 플레이트를 깨끗한 실험실 작업대에서 1시간 동안 건조시킵니다. 48시간 처리 후 S-버퍼로 벌레를 세척하고, FITC-덱스트란 보조 플레이트와 FITC-덱스트란이 없는 NGM 플레이트로 옮긴 후 하룻밤 배양합니다.

다음 날, S-버퍼로 벌레를 씻고, 신선한 NGM 한천 플레이트에서 1시간 동안 기어 다니게 하세요. 검은색 96웰 평평한 바닥판의 각 웰에 4% 포름알데히드 50마이크로리터를 추가하고, 각 웰에 약 50마리의 벌레를 옮깁니다. 1분에서 2분 후에 모든 포름알데히드를 제거하고, 각 웰에 100마이크로리터의 마운팅 매개체를 추가하세요.

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마지막 업데이트: 22 8월 2026