야생 내생 바이러스의 분리 초파리 엔지니어링된 허용성 세포주 사용

성별과 종이 동일한 마취된 성체 Drosophila가 들어 있는 튜브로 시작하십시오.

완충액을 첨가하고 균질화하여 내생 바이러스 군집과 박테리아를 방출시킵니다.

균질액을 원심분리한 후, 상층액을 원심분리기를 이용해 멤브레인에 통과시켜 박테리아와 부유물을 제거합니다.

여과액을 RNA 바이러스에 감수성이 있는 조작된 Drosophila 세포 배양이 포함된 멀티웰 플레이트에 옮기고 배양합니다.

바이러스가 숙주 세포로 진입합니다. ~을 통해 수용체 매개 세포내섭취.

세포 내부로 진입하면 바이러스 게놈이 복제되어 이중 가닥 RNA(dsRNA)를 생성합니다. 중간체.

숙주 세포는 dsRNA에 결합하는 억제 단백질을 발현하여, 숙주 방어 효소인 Dicer에 의한 dsRNA의 분해를 방지합니다.

이를 통해 바이러스 RNA 합성과 바이러스 단백질 생산이 가능해지며, 바이러스의 복제와 증폭이 촉진됩니다.

높은 바이러스 농도는 숙주 세포의 성장을 저해하고 세포병성 효과를 유발합니다.

플레이트를 짧게 원심 분리합니다.

바이러스 집단이 포함된 상청액을 수집하고, 후속 분석을 위해 저온에서 보관하십시오.