Lineage Labeling of Zebrafish Cells with Laser Uncagable Fluorescein Dextran

Joshua A. Clanton; Ilya A. Shestopalov; James K. Chen; Joshua T. Gamse

doi:10.3791/2672

레이저 Uncagable 플루오레신 Dextran과 Zebrafish 세포의 리니지 라벨

JoVE Journal
Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Biology

Lineage Labeling of Zebrafish Cells with Laser Uncagable Fluorescein Dextran

레이저 Uncagable 플루오레신 Dextran과 Zebrafish 세포의 리니지 라벨

Full Text

14,331 Views

07:35 min

April 28, 2011

DOI: 10.3791/2672-v

Joshua A. Clanton¹, Ilya A. Shestopalov², James K. Chen², Joshua T. Gamse¹

¹Department of Biological Sciences,Vanderbilt University, ²Department of Chemical and Systems Biology,Stanford University

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

이 프로토콜은 uncaged 플루오레신에서 신호를 증폭하기 위해 immunolabeling 전체 산 뒤에 갇힌 플루오레신의 UV - uncaging를 사용하여 셀 zebrafish의 배아의 작은 그룹의 운명을 라벨 및 추적하는 방법을 delineates.

이 절차의 전반적인 목표는 제브라피시 배아의 세포를 계보로 분류하는 것입니다. 이것은 먼저 우리에 갇힌 플루오레세인을 합성하고 이를 제브라피시 배아에 주입함으로써 이루어집니다. 그런 다음 배아를 아가로(agarro)에 장착하여 표지할 세포에 접근할 수 있도록 합니다.

다음으로, UV 레이저를 사용하여 배아의 선택된 세포에서 케이지 된 플루오레세인을 활성화합니다. 마지막으로, 배아는 원하는 단계로 발달한 후 수확하고 표지된 세포는 특정 계통의 마커와 관련하여 검출됩니다. 궁극적으로, 배아에서 선택된 세포의 운명을 보여주는 결과를 포토 언케이징(photo uncaging)과 면역형광 현미경 검사를 통해 얻을 수 있습니다.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos