In vitro Mouse Bone Marrow Stromal Cell Differentiation into Adipocytes(체외 마우스 골수 기질 세포에서 Adipocytes로의 분화)

0 조회수3:03 • July 8th, 2025

지방세포 또는 지방 저장 세포는 면역 반응을 조절하는 면역 신호 분자인 아디포카인을 분비하는 지방 조직의 우세한 세포입니다.

시험관 내에서 지방세포를 생성하려면 마우스 골수 간질 세포, BMSC(미분화 다능성 세포)의 부착 배양물을 포함하는 멀티웰 플레이트로 시작합니다.

세포의 분화를 유발하기 위해 포스포디에스테라제 효소 억제제와 덱사메타손(합성 글루코코르티코이드)을 함유한 지방세포 유도 배지로 세포를 처리합니다.

억제제는 세포에 들어가 고리형 아데노신 일인산염 또는 cAMP를 분해하는 데 필수적인 효소인 고리형 뉴클레오티드 포스포디에스테라제를 비활성화합니다. 이러한 억제는 세포 분화에 중요한 세포내 cAMP 수준을 증가시킵니다.

덱사메타손은 BMSC의 세포내 수용체에 결합하고 핵으로 들어가 지질 합성 및 축적에 관여하는 유전자를 활성화합니다. 이것은 BMSC를 성숙한 지방세포의 전구체 세포인 전지방세포로 분화하도록 유도합니다.

사용한 배지를 새로운 유도 배지로 교체하여 전지방세포를 유지합니다. 특정 기간 후, 고포도당과 인슐린을 함유한 지방세포 염기 배지로 세포를 처리합니다.

인슐린은 특정 세포 표면 수용체에 결합하고 세포 표면에서 포도당 수송체의 전위를 활성화하여 전지방세포로의 포도당 흡수를 촉진합니다. 세포는 과도한 포도당을 활용하여 지질 방울을 합성하여 지방 생성(지질 축적 과정)을 일으켜 성숙한 지방세포로의 분화를 촉진합니다.

지질 염색 염료로 세포를 처리하고 광학 현미경으로 관찰합니다. 성숙한 지방세포는 여러 개의 빨간색 지질 방울이 있는 둥근 세포로 나타납니다.

골수 줄기 세포 지방 세포 분화를 유도하려면 합류 골수 세포 배양의 세포 배양 배지를 지방 세포 유도 배지로 교체하십시오. 배양 2일 후, 상청액을 신선한 지방세포 유도 배지로 교체하고 4일째에 지방세포 기반 배지로 전환합니다. 7일째에 세포에 지질 방울이 축적되었고 표현형의 표시가 성숙한 지방세포와 유사한지 확인합니다.