0 조회수 • 3:25 분 • July 8th, 2025
나이브 T 세포와 항원 제시 세포, APC 사이의 다중 세포-표면 수용체-리간드 상호작용은 T 세포 활성화 및 증식을 유도합니다.
이 과정에서 두 가지 주요 사건은 CD3-T 세포 수용체 복합체에 의한 APC 발현 항원의 인식과 APC 발현 B7 리간드와 T 세포 수용체 CD28 사이의 상호 작용을 포함합니다.
시험관 내에서 T 세포 활성화 및 증식을 연구하려면 적절한 배양 배지에 현탁된 인간 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)를 섭취하십시오. 항-CD3 및 항-CD28 항체로 코팅된 마그네틱 비드를 추가하고 세포를 두 개의 원추형 튜브로 나눕니다.
사이토카인 인터루킨-2, IL-2를 첫 번째 튜브에 추가하고 인터루킨-15, IL-15를 다른 튜브에 추가합니다. 세포를 멀티웰 플레이트로 옮깁니다. 인큐베이트.
비드의 항-CD3 및 항-CD28 항체는 각각 T 세포에서 발현되는 CD3-T 세포 수용체 복합체 및 CD28 수용체에 결합하여 T 세포 활성화 및 증식을 유발합니다.
IL-2를 사용하면 사이토카인이 활성화된 T 세포 표면의 수용체에 결합하여 이펙터 T 세포로 분화 및 증식됩니다. 반대로, IL-15는 주로 T 세포의 분화 및 기억 T 세포로의 증식을 유도합니다.
세포의 절반을 재현탁하고 새로운 웰로 옮겨 세포 성장을 허용합니다. 후속 분석을 위해 사이토카인으로 분화된 T 세포 집단을 유지하기 위해 IL-2 또는 IL-15를 포함하는 신선한 배지를 추가합니다.
시작하려면 백만 세포당 12.5마이크로리터의 비드를 미세 원심분리기 튜브로 옮기고 튜브에 있는 비드 12.5마이크로리터당 12.5마이크로리터의 PBS를 추가하여 CD3/CD28 비드를 세척합니다. 그런 다음 미세 원심분리기 튜브를 적절한 자석 위에 1분 동안 놓고 완충액을 버리고 T-세포 배지의 원래 부피에 비드를 재현탁합니다.
다음으로, 1:2 비드 대 세포 비율로 100만 세포당 12.5마이크로리터의 비드를 추가하고, 세포를 각각 약 500만 개의 세포가 있는 두 가지 조건으로 나눕니다. 그런 다음 각 조건에 정확한 양의 사이토카인을 추가하고 세포를 멀티웰 플레이트로 옮깁니다. 세포를 섭씨 37도 및 이산화탄소 5%에서 3일 동안 배양합니다.
배양 3일 후, 사이토카인 농도의 두 배로 신선한 T 세포 배지를 준비합니다. 각 웰에서 부피의 절반을 새 웰로 옮겨 세포를 재현탁하고 분할합니다. 그런 다음 새로 준비된 T 세포 배지를 각 웰에 동일한 부피의 T 세포 배지를 추가합니다.
본 연구에서는 항원제시세포(APC)와의 수용체-리간드 상호작용을 통한 T 세포의 활성화 및 증식을 조사합니다. 연구 방법으로는 인간 말초혈액 단핵구(PBMC)를 배양하고, 특정 항체와 사이토카인을 사용하여 T 세포 반응을 촉진하는 과정이 포함됩니다.
PBMC로부터 인간 T 세포를 ex vivo에서 강력하게 활성화하고 분화시키는 것은 면역학 기반의 신약 개발 및 중개 연구의 기초가 됩니다. 본 프로토콜은 작동 및 기억 T 세포 군집의 표준화된 생성을 가능하게 하여, 초기 단계의 타겟 검증 및 기능적 스크리닝에서 예측 신뢰도를 높여줍니다. 신뢰할 수 있는 T 세포 배양 시스템은 면역 조절 전략의 리스크를 줄이고 면역 요법 파이프라인의 포트폴리오 결정을 추진하는 데 매우 중요합니다.
본 T 세포 배양 프로토콜은 초기 발견부터 전임상 단계까지의 연속 과정에 통합되어, 면역 반응의 가설 검증, 스크리닝 및 중개 모델링을 가능하게 합니다.
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마지막 업데이트: 29 8월 2026