$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
피하 종양이 있는 마취된 마우스로 시작합니다.
이 종양 미세 환경에서 T 조절 세포는 항원 제시 세포 또는 APC에서 CD80과 강하게 상호 작용하는 항세포독성 단백질을 발현하여 기존의 T 세포 상호작용을 방지합니다.
수술 부위를 소독하고 종양 근처에 피부를 절개합니다.
상처를 열어 종양을 노출시키고 부분적으로 다듬어 종양 조직의 잔해를 남깁니다.
상처를 닫고 마우스가 회복될 수 있도록 합니다.
수술 후 항세포독성 단백질에 특이적인 항체로 채워진 주사기를 가져와 보조 또는 추가 요법을 위해 마취된 마우스에 복강 내 주사합니다.
이 항체는 종양 부위로 이동하여 T 조절 세포의 항세포독성 단백질에 결합하여 기능을 차단합니다.
이를 통해 APC는 T 세포와 상호 작용하여 활성화하여 세포독성 분자를 방출할 수 있습니다.
이 분자는 남아 있는 종양 세포를 죽여 잠재적으로 종양 재성장을 감소시켜 효과적인 보조 요법을 시사합니다.
클로르헥시딘으로 수술 부위를 면봉으로 닦아 수술을 시작하십시오. 집게와 가위를 사용하여 종양에서 3mm 떨어진 등쪽을 따라 센티미터 직선 절개를 합니다.
종양을 직접 덮고 있는 피부는 잘 치유되지 않으므로 절단하지 마십시오. 메스를 사용하여 종양을 자르지 말고 핀셋을 사용하여 조각을 퍼냅니다.
핀셋을 사용하여 종양과 복막 사이의 근막과 피하 지방 조직을 당겨 제거합니다. 피하 종양은 일반적으로 피부 쪽에 부착됩니다.
핀
셋으로 종양이 있는 쪽의 피부를 부드럽게 잡고 상처를 열고 종양이 외부로 보이도록 반전시킵니다. 가위를 사용하여 종양 바닥에서 시작하여 개구부에 가장 가까운 종양 기저부에서 시작하여 절반에서 종양 캡슐을 잘라냅니다.
50% 벌크 수술의 경우 종양 중앙을 가로질러 절단합니다. 구부러진 겸자를 사용하여 제거할 종양 부분을 퍼냅니다. 부피가 감소한 부위에서 잔여물을 퍼냅니다. 75% 용적을 줄이려면 50% 종양 용적을 수행하는 것으로 시작합니다. 그런 다음 종양의 나머지 50%를 반으로 자릅니다. 곡선 겸자를 사용하여 종양의 25%를 퍼냅니다.
수술 부위를 봉합하려면 남은 종양을 피부 아래에 다시 놓고 겸자를 사용하여 피부 피판을 함께 당기고 상처를 따라 피부를 정렬합니다. 상처 가장자리에서 5mm 떨어진 곳에서 피부를 함께 잡고 겸자에 가장 가까운 쪽부터 시작하여 수술용 클립을 사용하여 상처를 봉합합니다.
밑에 있는 조직이 노출되지 않도록 필요한 만큼 클립을 붙입니다. 일반적으로 클립 사이에 3mm의 간격을 두고 4-2개의 클립이 적용됩니다. 쥐를 따뜻한 가열실에 넣어 회복할 수 있도록 합니다. 마우스의 케이지를 히트 패드 위에 놓습니다.
마
취에서 회복될 때까지 가열실에서 쥐를 모니터링합니다. 그런 다음 쥐를 다시 케이지에 넣습니다. 쥐가 더 활동적이 될 때까지 케이지를 열 패드 위에 10분 더 둡니다. 쥐에게 젖고 부드러운 음식을 주세요. 회복을 위해 수술 후 1시간 동안 마우스를 모니터링합니다.
하루가 끝날 때와 다음날 아침에 마우스를 다시 모니터링하고 클립이 제자리에 있는지 확인하십시오. 관심 있는 치료에 따라 주어진 시간에 보조 또는 신보조 요법으로 수술 전후 마우스를 치료합니다. 예를 들어, 접종 후 15일째에 100마이크로그램의 항-CTLA-4를 복강 내 1회 용량으로 마우스를 치료합니다.