인간 PBMC가 이식된 인간화 이종이식 마우스 모델을 생성하는 기술

기능성 면역 세포로서 호중구와 단핵구만 보유하는 면역 저하 마우스를 예로 들어 보겠습니다.

면역 전구 세포를 표적으로 하는 약물인 시클로포스파미드를 복강 내 주사합니다.

이 약물은 활발하게 증식하는 면역 전구 세포에 들어가 핵산을 가교하여 세포 사멸을 일으킵니다. 전구 세포의 죽음은 면역 세포 고갈로 이어집니다.

시클로포스파미드와 부가물을 형성하는 약물인 디설피람을 경구 투여하여 시클로포스파미드로 인한 부작용을 줄입니다.

인간 종양 세포와 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)의 혼합물을 적절한 젤라틴 단백질 혼합물에 피하 주입합니다.

단백질 혼합물은 생리학적 세포외 기질을 모방하여 겔을 형성하고 종양 세포를 포획합니다.

기능적 면역 세포 고갈은 종양 세포가 증식하고 새로운 혈관을 형성하여 고형 종양 이종이식편으로 변형되도록 합니다.

동시에 주입된 PBMC의 T 세포가 종양에 침윤합니다.

종양 이종이식편은 성장 및 종양 침윤 T 세포를 나타내어 인간화 이종이식 마우스 모델을 확립합니다.

골수 세포 고갈을 위해, 시클로포스파미드 킬로그램당 100 밀리그램을 복강 내 전달하고, 6 내지 8주령 NOD/SCID 암컷 마우스에게 2일 동안 하루 한 번 1 킬로그램당 125 밀리그램의 디설피람을 경구 전달한다. 시클로포스파미드 및 디설피람의 2차 투여 후 24시간 후, 5 x 10 6 신선하게 분리된 인간 PBMC 및 2.5 x 10⁶ 인간 종양 세포주 세포를 200마이크로리터의 PBS와 동물당 50% 마트리겔에 넣고 전체 부피를 각 실험 동물의 오른쪽 옆구리에 피하 주입합니다. 4-6주 동안 일주일에 2회 원발성 종양 부피를 측정하고 기록합니다.