면역 관련 유전자를 마우스 피부 조직으로 전달하는 Acufection-Mediated Delivery

사이토카인 인터루킨-15 발현이 결여된 마취된 유전자 변형 마우스를 준비합니다.

등쪽 옆구리 피부를 면도하고 제모 크림을 발라 남아 있는 모간을 제거하면 후속 단계에서 피부에 DNA 주입이 개선됩니다.

등쪽 피부 표면을 멸균하고 DNA 이식을 위한 대상 영역을 표시합니다.

인터루킨-15를 암호화하는 플라스미드 DNA를 표시된 표면에 작은 방울을 도포합니다.

침술 바늘 묶음을 사용하여 표시된 피부 표면을 반복적으로 찔

러줍니다.

바늘 다발의 찌르는 동작은 피부 표면을 부드럽게 진동시켜 가장 바깥쪽 피부층의 죽은 세포를 느슨하게 합니다.

또한, 진동 바늘은 세포의 원형질막을 긁어내어 각질세포 및 수지상 세포를 포함한 세포로의 침술 또는 침술 매개 DNA 전달을 촉진합니다.

이제 마우스가 복구되도록 합니다.

피부에서 성공적으로 형질감염된 세포는 인터루킨-15 단백질을 생성합니다.

쥐를 마취한 후 건조함을 방지하기 위해 동물용 안과 연고를 눈에 바릅니다. 그런 다음 동물의 등 피부를 면도하고 제모 크림을 발라 남은 모간에 있는 케라틴 단백질을 녹입니다. 제모 후 물에 적신 면으로 크림을 닦아냅니다.

70% 에탄올에 적신 멸균 면봉을 사용하여 피부 표면을 소독하고 미리 준비된 템플릿으로 대상 피부 부위를 표시합니다. 10마이크로그램의 플라스미드 DNA가 함유된 DNA 용액 10마이크로리터를 원하는 피부 부위에 도포합니다. 마우스를 지하로 삼으려면 침술 장치를 피부에 수직으로 대고 30초에 걸쳐 또는 피부에 도포된 용액이 흡수될 때까지 지정된 표면을 100회 반복적으로 천공합니다.

피부 조직에서 성공적인 플라스미드 DNA 발현을 달성하려면 피부 깊숙이 절단하는 것을 피하고 DNA 용액이 잘 흡수되는지 확인하는 것이 중요합니다.

시술을 마친 후, 주후를 걸린 마우스를 온열 패드 위에 올려 마취에서 회복될 때까지 체온을 유지한다. 쥐가 충분한 의식을 되찾으면 새장으로 돌려보내 물과 음식을 제공하십시오. 시술 후 처음 48시간 동안 행동 변화, 비정상적인 모습을 포함한 불편함 증상이 있는지 마우스를 면밀히 모니터링하십시오.