micro-electrode arrays에 결합된 3차원 뉴런 네트워크 구축

0 조회수2:39 • July 8th, 2025

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쥐 배아 해마 뉴런의 현탁액을 취하십시오.

뉴런을 미세전극 어레이 또는 MEA의 접착 인자로 코팅된 활성 영역으로 옮깁니다. 이 활성 영역은 폴리머 구조에 의해 제한됩니다.

MEA를 인큐베이팅합니다. 뉴런은 코팅된 MEA 활성 영역에 부착되어 2D 뉴런 네트워크를 형성합니다.

또한 뉴런을 멀티웰 플레이트 내의 멤브레인 삽입물에 있는 접착 인자로 코팅된 유리 마이크로비드 단층으로 옮깁니다.

뉴런이 접착 인자 코팅 비드에 부착되도록 배양합니다.

부착 뉴런이 있는 마이크로비드를 뉴런 네트워크를 포함하는 제한된 MEA 영역으로 옮깁니다.

마이크로비드는 자가 조립되어 육각형 구조를 형성합니다.

MEA에서 마이크로비드 전송을 여러 번 반복하여 자체 조립되는 레이어를 구축하여 압축된 3D 구조를 형성합니다.

MEA 제한된 활성 영역에 배지를 추가하고 배양합니다.

뉴런이 성장하여 상호 연결된 3D 뉴런 네트워크를 형성합니다.

2D 뉴런 네트워크를 생성하기 위해 PDMS 제약 조건에 의해 정의된 MEA의 활성 영역에 평방 밀리미터당 2,000개 세포의 밀도로 세포를 도금합니다. 그런 다음 MEA 장치를 섭씨 37도에서 5% 가습된 이산화탄소 분위기의 인큐베이터에 넣습니다.

3D 배양 구성을 위한 예비 단계를 완료하기 위해, 마이크로리터당 600 내지 700 세포의 세포 농도를 가진 160 마이크로리터의 현탁액을 멀티웰 플레이트 내부에 위치한 마이크로비드 단층의 표면에 분배합니다. 그런 다음 멀티웰 플레이트를 섭씨 37도에서 5% 가습된 이산화탄소 분위기의 인큐베이터에 넣습니다.

도금 후 6-8시간 후, 마이크로비드와 뉴런이 있는 현탁액 30-40마이크로리터를 PDMS 제약 조건으로 구분된 MEA 영역으로 옮깁니다. 각 전송 후 마이크로비드가 육각형 조밀한 구조로 자체 조립될 때까지 약 30분 정도 기다리십시오. 모든 층이 증착되고 자발적으로 조립되면 PDMS 제약 조건으로 구분된 영역의 상단에 300마이크로리터의 배지를 추가합니다.

MEA에 결합된 3D 구조를 섭씨 37도, 이산화탄소 5%의 인큐베이터에 48시간 동안 넣습니다.

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마지막 업데이트: 22 8월 2026