혈액 유래 만능 줄기 세포에서 신경 세포 생성

우물 바닥에 유리 커버슬립이 놓인 마이크로플레이트를 가져 가십시오.

양전하를 띤 폴리머를 도입하여 커버슬립을 코팅하고 세척하여 결합되지 않은 폴리머를 제거합니다. 세포외 기질 단백질로 처리하여 커버슬립을 코팅하고 결합되지 않은 단백질을 흡인합니다.

코팅은 세포 접착을 촉진하는 배양 기질 역할을 합니다.

웰에 유도 배지를 추가하고 혈액 유래 만능 줄기 세포 또는 BD-PSC의 현탁액을 도입합니다. 다양한 세포 유형으로 분화할 수 있는 이 세포는 혈액 전구 세포를 재프로그래밍하여 생성됩니다.

세포가 기질에 부착되도록 배양합니다. 유도 배지의 성장 인자와 영양소는 BD-PSC를 신경 전구 세포로 변환합니다.

신경 성장 인자를 포함하는 분화 배지를 도입하고 배양하여 신경 전구세포를 신경 표현형으로 분화하여 확장된 세포 과정과 세포 간 접촉을 나타냅니다.

유리 커버슬립을 4웰 플레이트에 넣고 이중 증류수에 1-5 희석된 폴리-L-오르니틴으로 코팅합니다. 커버슬립을 섭씨 37도에서 1시간 동안 배양한 후 이중 증류수로 세척합니다.

라미닌 밀리리터당 0.5-2mg을 천천히 해동하고 커버슬립 상단에 첨가합니다. 섭씨 37도에서 2시간 동안 배양한 다음 피펫팅으로 과도한 라미닌을 제거하고 배양 접시에 신경 배지 N2를 첨가합니다.

새로

BD 생성 세포의 뉴런 분화를 시작하기 위해 인큐베이터에서 2일 동안 인큐베이터에서 2일 동안 라미닌-오르니틴 코팅 유리 커버슬립 위의 N2 배지에서 BD 유래 CD45 음성 세포를 배양합니다. 다음으로, 신경 분화 배지에서 세포를 배양하고 플레이트를 섭씨 37도 및 이산화탄소 5%의 인큐베이터에 16일 동안 넣습니다.