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신경과학
0 조회수 • 1:44 분 • July 8th, 2025
세포 접착을 촉진하기 위해 세포 배양 기질로 코팅된 배양 접시를 가져 가십시오.
접시에는 중앙에 부착된 베이스가 없는 원웰 배양 인서트가 포함되어 있어 정의된 구획을 만듭니다. 이 구획의 윤곽은 세포 이동을 관찰하기 위해 접시에 표시되어 있습니다.
뇌실주위 내피 세포 또는 PVEC, 뇌의 혈관을 감싸는 세포, 뇌 발달 중에 PVEC를 따라 이동하는 중간 뉴런을 포함하는 구획에 세포 현탁
액을 도입합니다.수분을 유지하기 위해 접시에 공동 배양 배지를 추가하고 세포가 기질에 부착되는 것을 촉진하기 위해 배양합니다.
물리적 장벽을 제거하기 위해 인서트를 제거합니다. 배지를 새로 고치고 다시 배양합니다.
PVEC는 증식하여 삽입 경계를 넘어 내피 세포 네트워크를 확장합니다.
PVEC는 안내 단서 역할을 하는 인자를 분비하여 중간 뉴런이 PVEC 네트워크를 따라 이동하도록 지시합니다.
인터뉴런 이동을 나타내는 공동 배양은 분석할 준비가 되었습니다.
공동 배양 분석을 수행하려면 30,000개의 GABA성 인터뉴런과 30,000개의 인간 뇌실주위 내피 세포를 70마이크로리터의 공동 배양 배지에 현탁시킵니다. 그런 다음 이 세포 용액을 1웰 삽입 구획 내부에 시드합니다. 48시간 후 인서트를 제거합니다. 공동 배양을 섭씨 37도 및 5% 이산화탄소에서 5일 동안 배양합니다.