조혈전구세포(Hematopoietic Progenitor Cells)를 신경 줄기세포(Neural Stem Cells)로 직접 재프로그래밍(Direct Reprogramming of Hematopoietic Progenitor Cells into Neural Stem Cells)

0 조회수3:05 • July 8th, 2025

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유전적으로 변형된 조혈 전구 세포의 세포 현탁액으로 시작합니다.

이 세포는 신경줄기세포로 재프로그래밍하는 데 필요한 전사 인자를 발현합니다. 이 프로세스를 직접 재프로그래밍이라고 합니다.

세포를 신경 전구 배지와 함께 세포외 매트릭스 코팅 멀티웰 플레이트로 옮기고 배양합니다.

세포외 기질은 세포 부착 및 성장을 위한 3차원 스캐폴드를 제공합니다.

배양하는 동안 조혈 전구 세포에 의해 발현되는 전사 인자는 신경 줄기 세포로의 변형을 허용하는 일련의 분자 사건을 시작합니다.

신경 전구 배지는 유도된 신경 줄기 세포의 생존에 유리한 인자를 포함합니다.

배양 후, 이 배지를 신선한 신경 전구 배지로 교체하여 세포 증식을 촉진합니다.

세포 스크레이퍼를 사용하여 세포를 분리합니다.

이 현탁액을 수집하고 세포를 신경 줄기 세포 배지가 들어 있는 웰로 옮깁니다.

유도된 신경 줄기 세포의 유지를 위해 배양합니다.

세포가 30-50% 합류하면 상청액을 흡인하고 예비한 다음 각 웰에 1밀리리터의 신경 전구 배지를 첨가합니다. 상층액의 구체를 사용하여 백업 플레이트를 만들려면 예비 상층액을 170배g에서 10분 동안 원심분리합니다.

그런 다음 상청액을 흡인하고 펠릿을 신경 전구 배지에 재현탁합니다. 매트리겔 코팅 24웰 플레이트에 플레이트; 세포가 60%에서 80%의 합류에 도달할 때까지 격일로 각 세포 플레이트의 배지를 교체합니다.

세포가 필요한 합류점에 도달하면 상청액을 흡인하고 각 웰에 1밀리리터의 신경 줄기 세포 배지를 추가합니다. 그런 다음 세포 스크레이퍼를 사용하여 세포를 해리한 후 매우 부드럽게 피펫팅합니다.

다음으로, 24웰 플레이트의 한 웰에서 6웰 플레이트의 한 웰로 세포를 옮깁니다. 웰에 배지 밀리리터를 더 추가하고 모든 웰에 대해 절차를 반복한 후 6웰 플레이트를 섭씨 37도 5% 이산화탄소 인큐베이터에 넣습니다.

세포가 60% 합류에 도달할 때까지 격일로 배지의 전체 부피를 변경합니다. 매번 세포를 해리하고 방금 그림과 같이 1:3 비율로 재도금합니다.

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마지막 업데이트: 1 8월 2026