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신경과학
0 조회수 • 2:15 분 • July 8th, 2025
영양이 풍부한 기저 분화 배지에 마우스 배아 줄기 세포 유래 신경 전구 세포가 들어 있는 젤라틴 코팅 멀티웰 플레이트로 시작합니다.
전구 세포는 생존력을 유지하기 위해 배지의 이러한 영양소를 활용합니다.
젤라틴으로 코팅된 표면에 세포가 부착될 수 있도록 배양한 다음 세척하여 부착되지 않은 세포와 파편을 제거합니다.
안정화제, 추가 영양소 및 세포 분화에 중요한 신경 성장 인자가 보충된 기초 분화 배지를 도입한 다음 배양합니다.
전구 세포는 영양분과 성장 인자를 소비하여 세포 과정을 확장하기 시작하는 뉴런으로 분화를 시작합니다.
동시에 안정화제는 독성 대사산물과 상호 작용하여 발달 중인 뉴런을 산화 손상으로부터 보호하여 생존력을 보존합니다.
영양 수준을 유지하기 위해 정기적으로 배지를 교체하십시오.
시간이 지남에 따라 뉴런은 성숙하여 더 긴 세포 과정인 축삭을 발달시킵니다.
또한 더 짧은 세포 과정인 수상돌기를 개발하여 줄기 세포가 뉴런으로 분화하는 것을 확인합니다.
약 500,000개의 마우스 배아 줄기 세포 유도체를 웰당 2밀리리터의 기초 분화 배지에 0.1% 젤라틴 코팅 플레이트에 시드합니다. 3상 2상 감화 프로토콜을 테스트하기 위해 유도체를 무작위로 세 그룹으로 나눕니다. 플레이트를 6시간 동안 배양합니다. 그런 다음 PBS 2밀리리터로 세포를 2회 세척하고 프로토콜에 따라 기저 분화 배지 2밀리리터, N2 B27 배지 1 또는 N2 B27 배지 2를 각 웰에 첨가합니다. 플레이트를 인큐베이터에 넣고 세포가 10일 더 분화하도록 하고 2일마다 해당 배지를 교체합니다.